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Thermo 反相色譜柱使用和維護說明

來源:濟南興諾科技發展有限公司   2016年07月27日 17:06  

首先,感謝您選擇性能*的 Thermo 色譜柱產品。

為了使您的色譜柱能發揮zui大的性能,敬請先閱讀以下說明:

 

1、 適用鍵合相

反相色譜柱鍵合相包括:C18、C8、C4、C1、Phenyl、PFP、aQ、Cyano1等。

 

2、 柱體積

色譜柱的柱體積可以通過以下公式估算:

                             V = 0.68πr2L

V 為色譜柱柱體積(mL),r 為色譜柱內徑(cm),L 為色譜柱的長度(cm)。

 

3、 色譜柱柱效測試與保存

    反相色譜柱出廠時都經過柱效測試,所用化合物為茶堿、鄰-硝基苯胺、苯甲酸甲酯和二甲苯,如有不同,以柱效報告為準。

    在條件允許情況下,請對新色譜柱進行柱效測試。

    反相色譜柱出廠時均保存在乙腈-水溶液中。

 

4、 溫度

所有硅膠基質色譜柱使用溫度應低于 60℃。

 

5、 樣品

    將樣品溶解在流動相或極性相近的溶劑中。如果使用梯度洗脫,則需要將樣品溶解在初始流動相或極性相近的溶劑中。

樣品溶液不應含有任何顆粒物,使用 0.5μm 或更小粒徑的濾膜過濾。同時建議在色譜系統中使用在線過濾器。

樣品溶液如果使用強溶劑(例如,流動相為水,樣品溶劑為甲醇),為達到較好峰形,需要降低進樣量(以 250x4.6mm 規格為例,小于 10μL)。

 

6、 流動相

   所有流動相,特別是含有緩沖鹽的流動相,當日實驗當日配制;如果使用了前日配制的流動相,請確保流動相 pH 值沒有變化,并確保流動相沒有長菌。

   流動相的 pH 值取決于您的應用和色譜柱填料類型。我們建議在所有的色譜柱上都僅使用 pH 范圍為 2~8 的流動相(Hypercarb 可以使用 pH 為 1~14 的流動相);如果需要使用pH 更高(2~10)的流動相,請選用 Hypersil GOLD、Syncronis C18、Betasil C18 等色譜柱,并請盡量避免使用無機緩沖鹽。

請盡量避免在常規流動相中使用很高比例的水(>95%)作為流動相,此類流動相僅適用于中等疏水的鍵合相,例如 Hypersil GOLD aQ、Aquasil C18、Syncronis aQ 等色譜柱。

所有流動相都需使用 2μm 濾膜過濾。

 

7、 色譜柱安裝

請小心操作色譜柱。

不要摔、碰色譜柱,這樣會損壞色譜柱床,使色譜柱性能下降。

使用合適的連接管路和接頭,確保色譜柱連接處死體積降到zui低(使用不銹鋼接頭時需要尤其注意)。我們建議使用SLIPFREE 接頭,此接頭與Thermo色譜柱以及其他品牌色譜柱均匹配。

 

8、 色譜柱平衡

在進行分析之前,請使用至少 20 倍柱體積的流動相沖洗色譜柱,以使色譜柱達到平衡。

 

9、 色譜柱保護

    對于“臟”的樣品以及組分未知的樣品,請盡量使用在線濾器或保護柱,如果可能,使用 SPE 小柱對樣品進行前處理是更好的選擇。上述做法可以有效延長色譜柱使用壽命。

 

10、 色譜柱清洗

常規清洗:

在儲存色譜柱之前,請使用至少 20 倍柱體積的不帶緩沖鹽的流動相沖洗色譜柱(去除緩沖鹽),再用更強的溶劑沖洗色譜柱(去除強保留成分,反相色譜通常使用甲醇或乙腈),然后使用合適的溶劑儲存色譜柱。

清洗強保留污染物:

使用如下試劑依次清洗色譜柱

20 倍柱體積不帶緩沖鹽的流動相;

20 倍柱體積甲醇或乙腈;

20 倍柱體積異丙醇;

20 倍柱體積正己烷或氯仿;

20 倍柱體積異丙醇;

20 倍柱體積甲醇或乙腈。

 

11、 色譜柱保存

    反相色譜柱,保存溶劑通常是含至少 30% 有機相的水溶液,也可在常規清洗后直接保存在有機相中。

    如果需要長時間儲藏,則需要使用較高比例的有機相(有機相比例至少大于 50%,但不建議使用純有機相)。

 

 

 

注意:如果違反上述規程,可能使色譜柱失去保修。

 

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