低壓超高效液相色譜儀是液相色譜技術的重要創新,通過優化壓力體系與分離機制,在保持超高效分離性能的同時,顯著提升了儀器的耐用性、操作便捷性和應用靈活性,成為現代分析實驗室的關鍵工具。
傳統超高效液相色譜儀(UPLC)依賴超高壓系統(通常≥15,000 psi)驅動亞2μm填料色譜柱,實現高效分離。而低壓超高效液相色譜儀通過改進色譜柱填料和流路設計,在較低壓力(如62 MPa以下)下即可達到類似分離效果。例如,福立LC5190采用新型分離材料,結合低壓預混合技術,在常規壓力范圍內實現高分辨率分離,同時降低泵系統壓力脈動,延長儀器壽命。
低壓超高效液相色譜儀的組成主要包括以下幾個部分:
1、輸液系統
高壓輸液泵:是系統的核心部件,負責將流動相以高壓穩定地輸送至色譜柱。需具備高輸出壓力(通常耐壓可達數百千克/平方厘米)、流量精度高、耐腐蝕等特點,常見類型為往復柱塞泵。
梯度洗脫裝置:用于實現流動相組成的連續變化,提高分離效果。低壓梯度通過泵前的電磁比例閥控制不同溶劑的混合比例,僅需一個高壓泵;高壓梯度則采用多個高壓泵分別輸送溶劑至泵后混合器,混合更精準且易自動化。
在線脫氣機:去除流動相中的溶解氣體(如氧氣),防止氣泡干擾檢測器或造成柱效下降。常用方法包括真空脫氣、惰性氣體吹掃等。
2、進樣系統
自動進樣器:實現高通量、高精度的樣品注入,減少人工誤差。支持程序控制進樣量和順序,提升分析效率。
壓力輔助進樣技術:通過壓力快速注入樣品,減少擴散和交叉污染,適用于微量分析。
3、分離系統
色譜柱:UHPLC的核心組件,內填亞2μm甚至更小粒徑的固定相填料(如1.7μm),顯著提升分離效率。柱長通常為10-30cm,內徑2-5mm,材質多為不銹鋼或耐壓聚合物。
保護柱:安裝在色譜柱前,填充較大粒徑填料(如5-10μm),用于吸附樣品中的雜質顆粒,延長主柱壽命。
柱溫控制器:精確控制色譜柱溫度,避免溫度波動影響分離效果。
4、檢測系統
檢測器:將分離后的組分濃度轉化為電信號。常用類型包括紫外-可見吸收檢測器、二極管陣列檢測器、熒光檢測器等。
數據處理系統:由計算機及軟件組成,負責數據采集、處理、存儲和分析報告生成,支持自動化控制及定量定性分析。
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