腫瘤發病和死亡情況異常嚴峻，其精準治療不容忽視，因此近年來各類腫瘤機制研究和創新療法開發的熱度居高不下。作為銜接基礎研究與臨床應用的關鍵環節，腫瘤動物模型在解析腫瘤發生、發展、轉移機制以及藥物研發與評估中發揮著至關重要的作用。

抗腫瘤藥物藥效學評價是小動物光學成像技術的基礎應用之一，利用熒光素酶標記腫瘤細胞，并移植入動物體內建立腫瘤疾病動物模型，給藥后應用小動物活體光學成像技術觀測腫瘤光學信號隨時間的變化情況，進而評價不同藥物、特定的給藥途徑、時間、劑量等給藥策略對于腫瘤的治療效果。

相較于分批處死動物以獲取實驗數據的傳統方法，活體成像技術利用細胞和分子水平的定性定量研究進行觀測記錄，在構建原位成瘤CDX模型相關研究過程中，更便于跟蹤疾病進展及腫瘤轉移情況，使得腫瘤模型的動態監測不似以往受限。

常見的螢光素酶有螢火蟲螢光素酶（Firefly luciferase，Fluc），海腎螢光素酶（Renilla luciferase，Rluc），Gaussia螢光素酶。它們在特定的條件下都可以催化各自的底物發出對應的光，這個過程無需激發器激發。其中，Fluc是使用廣泛的螢光素酶。

將帶有Fluc基因的載體通過轉染試劑等方法以一定手段轉入研究的腫瘤細胞中，并通過篩選得到穩定表達Fluc的穩轉細胞株。

成功構建穩轉株后，即可進行動物移植模型構建。此時一般是將Fluc細胞注射到小鼠體內。

常見的實驗操作如下：

1. 準備對數期生長的、細胞密度達80 - 90%左右的Fluc腫瘤細胞。

2. 將細胞懸液和Ceturegel™基質膠在4℃環境下按1:1比例進行稀釋。

3. 左手抓取固定裸鼠，于裸鼠右肩處皮下注射.

細胞接種一段時間后，可以進行活體成像檢測。首先麻醉實驗動物， 接著注射底物熒光素，最佳的檢測時間是在注射后10 - 15 min之間。但需要注意的是，對于不同的動物模型，發光動力學過程并不全一致，最好先進行預實驗。

注：探究抗腫瘤藥物HKB99對腫瘤生長及轉移的影響。（DOI: 10.1016/j.cmet.2019.09.014?）