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常溫凝膠滲透色譜系統核心原理

來源:上海杜凱生物科技有限公司   2025年07月01日 18:53  
  常溫凝膠滲透色譜系統(Gel Permeation Chromatography, GPC),也稱為尺寸排阻色譜(Sie Exclusion Chromatography, SEC),是一種基于分子大小分離物質的液相色譜技術。
 
  1.核心原理:凝膠滲透色譜的分析是利用體積排除機理,色譜柱裝填的是多孔性凝膠或微粒,這些凝膠顆粒具有三維網絡結構,其孔徑大小與待分離的高分子化合物分子尺寸相當。當樣品溶液通過色譜柱時,較小的分子能夠進入凝膠內部的孔隙,而較大的分子則只能沿著凝膠顆粒間的空隙流動。由于路徑不同,較小分子在柱中的停留時間較長,而較大分子則較快地流出色譜柱,從而實現按分子大小進行分離。
 
  2.檢測方法:在GPC分離過程中,選擇合適的檢測方法對于獲得準確的結果至關重要。常見的檢測方法包括光散射、粘度測量和折光率檢測等。其中,光散射檢測器可以用于檢測溶液中分子的平均分子質量和聚合度,為分析提供重要數據支持。
 
  常溫凝膠滲透色譜系統的使用注意事項:
 
  1.環境要求:常溫凝膠滲透色譜系統需要放置在平穩、穩定、通風的地方,避免受潮或溫度變化過大的環境。
 
  2.操作規范:操作人員應事先熟悉常溫凝膠滲透色譜儀的使用說明,了解儀器的操作流程和注意事項。操作人員應按照儀器操作流程進行操作,禁止私自調整儀器參數或進行不規范操作。
 
  3.樣品處理:樣品必須溶解在所選的溶劑中,否則會影響分離效果和檢測結果的準確性。對于難以溶解的樣品,可以嘗試加熱、攪拌、超聲等方法促進其溶解。樣品中不能含有顆粒物或雜質,以免堵塞色譜柱和儀器的其他部件。在進樣前,必須對樣品進行過濾處理。
 
  4.色譜柱保護:根據樣品的分子量范圍選擇合適的色譜柱,不同的柱具有不同的分離范圍。定期清洗和再生色譜柱,以去除吸附的雜質和恢復柱效。避免柱干涸,因為這會損壞固定相并影響分離效果。
 
  5.流動相管理:選擇與樣品兼容且不會對檢測器產生干擾的流動相。定期更換流動相和過濾器,防止流動相中的雜質和微生物滋生,堵塞色譜柱和儀器的其他部件。
常溫凝膠滲透色譜系統

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