有許多方法適用于定量樣品中核酸的數量,但紫外-可見光吸光度法是確定樣品中 DNA 或 RNA 濃度和純度的主要方法。
單鏈和雙鏈 DNA 都強烈吸收峰值吸光度波長為 260nm 的紫外線。簡單的濃度和純度測量涉及直接以微量方法或包含在塑料或玻璃比色皿中穿過樣品的光譜。根據 Beer-Lambert 定律,光穿過樣品的衰減與濃度和光穿過樣品的距離成正比
DNA 可以吸收亞可見光譜上光的目標物質。各種蛋白質的芳香族氨基酸和核糖核酸 (RNA) 都吸收大約 260 – 280nm 的光。鑒于難以確保樣品的絕對純度,樣品可能含有各種可能導致紫外吸光度的污染物。這可能會導致高估樣品中 DNA 的濃度。評估這些污染物對測量影響的純度比用于識別潛在的樣品問題。
紫外-可見分光光度法的工作原理
紫外-可見分光光度計配備了一個或多個入射光源通道,覆蓋了整個紫外-可見 (UV-Vis) 電磁光譜 (190 – 840nm)。分析人員使用特定波長范圍內的光脈沖選擇性地詢問分離的樣品。紫外-可見光檢測器實時獲取樣品的透射光譜,從而獲得樣品總光譜輸出的高分辨率測量值。這種分辨率和測量準確度對于根據目標分析物的光譜指紋圖譜定量目標分析物至關重要。
使用 DeNovix 對 DNA 進行紫外-可見光定量
DeNovix 一直參與超微量技術的開發,他們的執行官曾是 NanoDrop™ Technologies Inc. 的創始合伙人兼總裁。此后,DeNovix 開發了紫外-可見分光光度計之一,具有很高的精度和市場上最寬的動態范圍。
相關產品
免責聲明
- 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利。