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LiChrosorb色譜柱:經典反相柱的技術解析與應用指南

來源:廣州太瑋生物科技有限公司   2025年06月14日 11:09  
在高效液相色譜(HPLC)分析領域,色譜柱的選擇直接影響分離效果和數據可靠性。LiChrosorb作為默克(Merck)公司推出的經典反相色譜柱系列,自20世紀70年代問世以來,憑借其優異的穩定性和廣泛的適用性,成為制藥、環境檢測及食品分析等領域的基準柱之一。本文將深入解析LiChrosorb色譜柱的技術特點、性能優勢、應用場景及維護要點。

1.LiChrosorb色譜柱的技術背景

(1)歷史沿革

-由德國默克公司于1973年推出,是早期商業化硅膠基鍵合相色譜柱的代表產品。

-名稱"LiChrosorb"源自"LiChro"(液相色譜)和"sorb"(吸附劑)的組合。

(2)產品定位

-中端市場:介于基礎型C18柱與UPLC柱之間。

-通用型分析:適合方法開發、常規質量控制等場景。

2.核心技術與性能特點

(1)固定相特性

(2)鍵合相類型

-RP-18:十八烷基鍵合相,高疏水性,適合非極性化合物。

-RP-8:辛基鍵合相,中等保留,平衡疏水性與極性。

-CN:氰丙基相,正相/反相兩用。

-NH?:氨基柱,糖類分析專用。

(3)硅膠基質優勢

-高純度球形硅膠(>99.99%SiO?)。

-雙封端處理減少游離硅羥基,改善堿性化合物峰形。

3.典型應用場景

(1)制藥行業

-原料藥純度檢測:如抗生素(頭孢類)的雜質譜分析。

-藥典方法合規:符合USP L1(C18)、L7(C8)等分類。

(2)環境監測

-多環芳烴(PAHs):EPA 610方法推薦柱。

-農藥殘留:有機氯農藥的梯度洗脫分離。

(3)食品分析

-維生素檢測:脂溶性維生素(A/D/E)的等度分離。

-添加劑分析:防腐劑(苯甲酸、山梨酸)的快速篩查。

4.方法開發與優化建議

(1)流動相選擇

-基礎配方:甲醇/水(中性化合物)或乙腈/緩沖鹽(離子化物質)。

-緩沖液推薦:

-pH 2-3:磷酸鹽/甲酸

-pH 7-8:磷酸鹽(需控制柱溫<40℃)

適用于中等極性化合物分離

(3)色譜柱維護

-再生步驟:

1.甲醇沖洗30分鐘(1 mL/min)

2.0.1 M EDTA清洗(金屬污染時)

3.正己烷-異丙醇(1:1)處理脂溶性殘留

-保存條件:甲醇充滿柱體,4℃冷藏。

5.常見問題與解決方案

(1)峰拖尾

-可能原因:硅羥基效應或柱效下降。

-對策:

-添加0.1%三乙胺(堿性化合物)

-更換保護柱(當理論塔板數下降>20%)

(2)壓力升高

-排查步驟:

1.檢查在線過濾器

2.反向沖洗色譜柱

3.更換入口篩板

LiChrosorb色譜柱以其穩定的性能和豐富的選擇性,在傳統HPLC分析中持續發揮著重要作用。雖然新型超高壓柱(UHPLC)逐漸普及,但在常規實驗室、藥企QC部門及教學領域,LiChrosorb仍是經濟可靠的選擇。合理的方法開發和規范的維護保養,可顯著延長其使用壽命并保證數據重現性。 

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