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熒光定量PCR儀選型指南：通道數(shù)與檢測(cè)靈敏度的匹配策略
一、通道數(shù)選擇：實(shí)驗(yàn)需求與擴(kuò)展性的平衡
基礎(chǔ)需求匹配
單通道至四通道：適用于常規(guī)基因表達(dá)分析、病原體檢測(cè)（如新冠、HPV分型），例如LightCycler96的四通道設(shè)計(jì)可覆蓋FAM/VIC/ROX/Cy5等常用染料組合。
五通道及以上：支持高復(fù)雜度多重PCR（如同時(shí)檢測(cè)5種以上靶標(biāo)），需結(jié)合儀器是否支持卡夾式光路設(shè)計(jì)（如QuantStudio™5的6通道系統(tǒng)，可通過(guò)擴(kuò)展卡夾實(shí)現(xiàn)通道升級(jí)）。
未來(lái)擴(kuò)展性
選擇模塊化通道設(shè)計(jì)（如Bio-RadCFX96的4通道系統(tǒng)），避免一次性投入過(guò)高成本。
優(yōu)先選擇兼容主流熒光染料（FAM/HEX/ROX/Cy5）的儀器，減少染料適配成本。
二、檢測(cè)靈敏度：核心參數(shù)與實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景的適配
靈敏度指標(biāo)
單拷貝檢測(cè)能力：如Archimed系列可檢測(cè)1拷貝基因，適用于低豐度靶標(biāo)（如ctDNA、病毒載量監(jiān)測(cè)）。
分辨率：1.33倍至1.5倍的拷貝數(shù)差異檢測(cè)能力，滿足腫瘤MRD評(píng)估、基因突變篩查等高精度需求。
靈敏度優(yōu)化技術(shù)
溫控系統(tǒng)：±0.25℃的溫控精度（如QuantStudio™5）可減少非特異性擴(kuò)增，提升低濃度樣本信號(hào)穩(wěn)定性。
光學(xué)系統(tǒng)：采用菲涅爾透鏡或高強(qiáng)度固態(tài)光源（如LightCycler96的白光LED），增強(qiáng)熒光信號(hào)采集效率。
三、選型決策樹
常規(guī)實(shí)驗(yàn)：四通道+單拷貝靈敏度（如LightCycler96），覆蓋基因表達(dá)、SNP分型。
復(fù)雜多重PCR：五通道及以上+高分辨率（如QuantStudio™5），支持腫瘤多靶標(biāo)檢測(cè)。
超敏檢測(cè)：六通道+單拷貝靈敏度（如Archimed系列），適用于液體活檢、病原體低載量監(jiān)測(cè)。
結(jié)論：選型需結(jié)合實(shí)驗(yàn)復(fù)雜度、樣本豐度及預(yù)算，優(yōu)先選擇通道可擴(kuò)展、靈敏度可驗(yàn)證的儀器，并通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證實(shí)際性能。
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