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二手賽默飛熒光定量pcr儀q5優勢

來源:杭州實了個驗生物科技有限公司   2025年06月05日 22:42  

二手賽默飛熒光定量PCR儀 Q5 詳盡介紹

一、產品背景

賽默飛世爾科技(Thermo Fisher Scientific)是生命科學領科研儀器和解決方案提供者,其推出的熒光定量PCR儀(qPCR)系列涵蓋了多種不同性能和應用需求的產品。其中,Q5 系列(包括 Q5 和 Q5 plus 等變型)因其在多重檢測、溫控穩定性、軟件交互和自動化兼容方面的設計,成為實驗室常用設備之一。

熒光定量PCR技術自20世紀90年代以來在分子生物學、臨床診斷、環境監測、食品安全、轉基因檢測等領域迅速普及,Q5 系列儀器作為其中的典型產品,提供了穩定的擴增和實時熒光檢測平臺。隨著設備迭代更新,一些科研機構和企業會將舊型號設備轉為二手流通市場,從而降低科研成本、延長設備生命周期。

二、熒光定量PCR原理概述

熒光定量PCR(Quantitative Real-Time PCR)是一種結合傳統PCR擴增與實時熒光檢測的技術。其基本工作流程包括:

  1. 模板加樣:將目標DNA或cDNA、引物、熒光探針或染料與反應混合液加入反應孔中。

  2. PCR擴增:通過溫度循環(變性、退火、延伸)實現特定DNA片段的指數級擴增。

  3. 熒光檢測:使用熒光染料(如SYBR Green)或探針(如TaqMan)對擴增產物進行實時監測。

  4. 數據處理:儀器軟件通過熒光信號強度計算閾值周期(Ct值),用于分析模板初始拷貝數。

Q5 熒光定量PCR儀的設計目標之一,是在這一過程中確保溫控精確性和光路系統的靈敏度,以獲取準確的數據輸出。

三、Q5 PCR儀的主要技術參數

以下是 Q5 儀器常見的核心參數,僅供參考,實際配置可能根據出廠批次和型號略有不同:

項目參數
通量96孔(標準),可支持384孔(部分型號)
樣本體積范圍10–100 μL(常見為20–50 μL)
溫控精度±0.25°C
升降溫速率最大 5.0°C/s(依型號而異)
熒光檢測通道4–6通道(支持常見染料,如FAM、VIC、ROX、Cy5)
檢測靈敏度可檢測低至1拷貝/μL的DNA模板
軟件功能可實現絕對定量、相對定量、熔解曲線分析、基因分型等
數據導出格式支持.txt、.csv、.xls 等多種格式,便于后期數據分析

四、功能結構及設計要點

1. 溫控模塊

Q5 PCR儀采用半導體熱電控溫技術(Peltier加熱元件),確保每個孔內溫度一致,減少孔間差異對結果的影響。熱蓋設計可避免樣本蒸發,提高擴增效率。

2. 熒光檢測系統

光源為高亮度LED,結合多通道濾光片,實現多色同步檢測。熒光信號通過高靈敏CCD傳感器接收,自動校正背景,提高檢測準確性。

3. 用戶界面與軟件

設備搭配專用分析軟件,界面清晰,支持Ct計算、標準曲線建立、基因表達量對比分析等。部分型號可通過USB、網絡連接,實現遠程監控與控制。

4. 自動化兼容性

Q5 儀器支持與液體工作站等自動化設備對接,在高通量檢測中可發揮更大作用。同時,儀器外殼設計緊湊,可適應多種實驗臺和潔凈環境。

五、常見應用領域

1. 臨床分子診斷

檢測病毒載量(如HBV、HIV)、腫瘤基因表達水平、遺傳病篩查等。

2. 科研實驗

在分子生物學、細胞生物學、發育生物學等領域,用于基因表達分析、miRNA定量等。

3. 食品與農業

檢測轉基因成分、食品污染物、致病微生物等。

4. 環境監測

分析水體或土壤中的特定微生物、污染物DNA,輔助環境質量評估。

六、二手設備的選購建議

購買二手Q5熒光定量PCR儀時,應注意以下幾個方面:

1. 設備來源

確認設備原始用途、維護記錄以及使用頻率,優先選擇來自高校或科研機構的儀器,維護相對規范。

2. 檢測報告

要求供應方提供近期設備檢測報告,包括溫控測試、光學系統測試、Ct值一致性測試等。

3. 硬件狀態

檢查熱蓋、加熱模塊、光學路徑是否完好,排除腐蝕、積塵、鏡片老化等影響性能的問題。

4. 軟件授權

確認是否包含正版軟件及控制權限,有些儀器軟件需授權激活或聯網注冊,需提前核實。

5. 保修與售后

雖然是二手設備,仍建議選擇提供質保期和技術支持的渠道,避免后續無法維護或無法替換配件的情況。

七、使用維護注意事項

  1. 每次使用后應清潔樣本托盤和熱蓋,避免殘留影響下次實驗。

  2. 定期校準溫控系統與熒光通道,確保數據準確。

  3. 軟件操作時嚴格遵守用戶手冊要求,避免誤操作導致系統故障。

  4. 對使用頻率較高的實驗室,建議設立維護日志,記錄設備運行狀態及異常情況。

八、Q5 與同類設備對比(簡要)

與同類熒光定量PCR儀相比(如ABI QuantStudio、Bio-Rad CFX系列等),Q5 具有以下特點:

  • 溫控均一性較好,適合對擴增效率敏感的實驗;

  • 光路系統設計簡單,日常維護相對便捷;

  • 界面操作風格直觀,學習成本低;

  • 二手市場存量相對豐富,零部件可替換性強。

但同時也存在一些限制,如部分老型號軟件更新不及時,部分功能如高階熔解曲線分析需額外模塊支持等。

九、總結

二手賽默飛 Q5 熒光定量PCR儀作為一款經典的實時定量擴增檢測平臺,在科研及檢測應用中具有一定實用價值。通過合理選擇、規范維護,其仍可滿足日常基因定量分析的多數需求。對于預算有限或在構建初期實驗室的用戶而言,是一項具有性價比的設備選擇。


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