質量光度計(MassPhotometer)是一種用于單分子定量分析的儀器,主要通過測量生物大分子溶液中分子的質量來實現對樣品的分析。以下從技術原理和實際應用角度,分析其核心優點:
一、無需標記與固定,保留分子天然狀態
避免人為干擾:傳統單分子檢測技術(如熒光顯微鏡)需對分子進行熒光標記或固定在基底上,可能改變分子構象、活性或相互作用。
質量光度計通過光學反射原理直接測量溶液中分子的質量,無需任何化學修飾,確保分子處于天然溶液環境,數據更真實反映生理狀態。
適用范圍廣:可檢測蛋白質、核酸、病毒顆粒、納米顆粒等多種生物大分子,尤其適合結構動態變化敏感的樣品(如膜蛋白、蛋白復合物)。
二、單分子定量,高精度測量絕對質量
絕對質量測定:直接給出單個分子的絕對質量(單位:kDa),而非相對信號強度。例如,可區分同源蛋白的不同亞型(如100kDa與105kDa的差異),或檢測翻譯后修飾(如磷酸化、糖基化)引起的質量變化。
單分子統計分析:通過統計大量單分子數據(通常檢測數萬至數百萬個分子),提供質量分布直方圖和群體異質性分析,可識別樣品中的雜質、聚集體或構象異質性。
例:在抗體藥物分析中,可區分單體、二聚體與降解片段的比例。
三、操作簡便,快速獲取結果
無需復雜樣品制備:僅需將樣品稀釋至合適濃度(通常為nM至μM級),即可直接上樣檢測,避免傳統方法(如超速離心、凝膠電泳)的繁瑣流程。
實時動態監測:支持時間分辨測量,可追蹤分子組裝/解聚過程(如病毒衣殼組裝、淀粉樣纖維形成)或酶促反應中的質量變化,實時生成動力學曲線。
高通量篩選:部分型號支持多孔板(如96孔板)自動檢測,適合藥物篩選、蛋白穩定性優化等需要大量樣品對比的場景。
四、多場景適用性與兼容性
溶液環境兼容性:可在生理緩沖液、細胞膜模擬環境(如脂質體)、甚至細胞裂解液中直接檢測,貼近真實生物環境。
與其他技術聯用:可與色譜(如SEC-MP,尺寸排阻色譜-質量光度法聯用)結合,分離后實時檢測各組分的質量,提升復雜樣品的分析能力。
跨學科應用:不僅限于生物學,還可用于材料科學(如納米顆粒粒徑分析)、食品科學(如乳蛋白聚集體檢測)等領域。
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