藥篩自動化先鋒
CyBio FeliX助力細胞活力檢測
背景:
基于細胞表型的藥物篩選是當前藥篩的重要方法,是將擬設計的藥物所作用的靶細胞為研究對象,去評估藥物對細胞活力的影響,這是更接近生理條件的藥物篩選模型,可以很好地模擬藥物在體內的作用情況。 主要方法是應用細胞培養(yǎng)技術獲取所需細胞,將這些細胞與候選化合物相互作用,通過顯微鏡或酶標儀收集產生的信號,測定化合物的作用能力,從而對化合物進行篩選。
1. 需要進行大量化合物的篩選,人工操作工作效率低;
2. 每個化合物都要進行技術重復,人工加樣誤差大;
3. 基于細胞表型的化合物篩選對于環(huán)境潔凈度有很高的要求。
為解決以上難題,德國耶拿CyBio FeliX攜手Promega RealTime-Glo™ MT 細胞活力檢測試劑盒打造自動化實時細胞活力檢測平臺。CyBio FeliX不僅可以降低人工操作在移液工作中帶來的差異,保證精確度;減少用戶投入實驗的時間和精力,提高整體工作效率,協(xié)助快速篩選藥物;且德國耶拿CyBio FeliX的無外殼型號主機可以直接放進生物安全柜,滿足細胞實驗所需要的高潔凈度要求。
實驗設計:
使用Promega的 RealTime-Glo™ MT 細胞活力檢測試劑盒,并利用 CyBio-FeliX進行移液工作,對喜樹堿(一種 DNA 拓撲異構酶 I 抑制劑,以劑量依賴性方式誘導細胞凋亡)以4倍稀釋倍數(shù)連續(xù)稀釋8次,每個濃度做6個重復,進行 3 次獨立的細胞活力測定(A、B、C)。 使用的細胞是U2-OS細胞(人骨肉瘤上皮貼壁細胞)。記錄處理后的第 24、30 和 48 小時的發(fā)光情況。繪制每次測定的 log10[喜樹堿] 的細胞存活率百分比。報告每個獨立測定(A、B、C)和每個孵育時間的回歸變量以及測定批內的變異系數(shù)。
圖1 基于Promega的RealTime-Glo™ MT 細胞活力檢測試劑盒搭配德國耶拿CyBio FeliX全能型移液工作站進行實時細胞活力檢測的工作流程圖。
實驗結果
圖2在CyBio-FeliX上進行自動RealTime-Glo™ MT細胞活力測定結果圖譜,R^2^值表示回歸與實際數(shù)據(jù)的擬合,且通常接受的批內 CV% 值為 ≤10%。
根據(jù)結果可得,CyBio FeliX能夠很好地完成實時細胞活力檢測實驗中的移液工作,結果的精確度在可接受范圍內。說明在CyBio FeliX的助力下,不僅消除了繁瑣多變的手動液體處理工作,為研究人員提供了無人值守的便利,同時還能產生一致且可重復的結果。
CyBio FeliX全能型移液工作站
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