近年來，研究人員陸續(xù)報(bào)道了采用營養(yǎng)素、生長因子和激素取代血清，在無血清培養(yǎng)基中培養(yǎng)各種細(xì)胞系的方法。Mather和Sato（BBRC, 1985）報(bào)道在含有胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白、表皮生長因子、黃體生成素或促卵泡激素、生長調(diào)節(jié)素和生長激素的無血清培養(yǎng)基中，成功培養(yǎng)了Leydig和Sertoli細(xì)胞。

　　盡管其中的激素及其濃度專用于特定的細(xì)胞類型，但人們還是發(fā)現(xiàn)杜氏改良Eagle培養(yǎng)基（DMEM）與Ham's F-12營養(yǎng)混合液的1：1混合物適于這類研究。這種混合物名為 DMEM/F12培養(yǎng)基，含有21種氨基酸、10種維生素、葡萄糖、鐵和鋅等成分。

　　Sigma-Aldrich旗下的DMEM/F12是比DMEM更加營養(yǎng)和復(fù)雜的培養(yǎng)基。配方中可加入HEPES緩沖液（終濃度15 mM）補(bǔ)償無血清造成的緩沖能力損失。這種合成培養(yǎng)基不含任何血清、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)或生長因子，因此需要根據(jù)細(xì)胞培養(yǎng)類型補(bǔ)充胎牛血清(FBS)等營養(yǎng)成分。某些商業(yè)配方可能含有谷氨酰胺或酚紅。

　　Sigma-Aldrich DMEM/F12 培養(yǎng)基的應(yīng)用

　　改良后的DMEM/F12基礎(chǔ)培養(yǎng)基通常用于需要低血清或無血清的培養(yǎng)應(yīng)用，如三維類器官培養(yǎng)或干細(xì)胞培養(yǎng)。DMEM/f12 培養(yǎng)基還可用于優(yōu)化需要低血清或無血清條件的細(xì)胞轉(zhuǎn)染。

　　除了通常需要低血清或無血清環(huán)境的干細(xì)胞培養(yǎng)，原代細(xì)胞也可在 DMEM/F12 培養(yǎng)基中培養(yǎng)，其中包括成纖維細(xì)胞、MDCK 細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞系、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞。與補(bǔ)充高濃度血清的原代細(xì)胞相比，它們表現(xiàn)出同等或更生長趨勢和功能。用 DMEM/F12 培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞也顯示出與高血清條件下培養(yǎng)的細(xì)胞相同的細(xì)胞形態(tài)。