細胞克隆篩選系統是基于多種技術實現對目標細胞克隆篩選的。其中,熒光標記技術是關鍵之一。通過將特定的熒光蛋白或熒光染料與目標基因或蛋白質偶聯,使表達目標產物的細胞能夠發出特定波長的熒光信號,從而在眾多細胞中被識別出來。例如,在抗體制備中,可將編碼抗體重鏈和輕鏈的基因分別與不同熒光蛋白基因融合表達,當細胞成功表達完整的抗體時,會同時顯示兩種熒光信號,以此作為篩選標志。
此外,圖像分析技術也不可少。系統配備高分辨率的成像設備,能夠捕捉細胞的形態、熒光強度等特征信息,并借助專業的圖像分析軟件對這些數據進行處理和分析,快速準確地判斷細胞是否符合篩選標準。
細胞克隆篩選系統的主要類型及特點:
-高通量系統:這是一款專為哺乳動物細胞系開發設計的系統,擁有5組熒光通道,可同時使用3組,能夠在短時間內自動化篩選并挑取更高水平表達的細胞克隆。它避免了傳統的有限稀釋方法,顯著提高了篩選效率和克隆產量,節省了時間和成本。該系統簡化了從初始克隆篩選到單克隆驗證的整個過程,對于抗體開發和生物制藥開發至關重要,可確保準確性與高效性。
-微生物克隆篩選系統:主要用于自動化合成生物學工作流程,可快速準確地選擇和篩選微生物克隆,非常適合DNA組裝、蛋白質工程和抗體開發等應用,具有可擴展性與高效性的特點。
一般包括以下幾個步驟:將待篩選的細胞接種到合適的培養板或培養皿中,使其形成單克隆細胞群落。然后,對細胞進行熒光標記或采用其他可檢測的標記方式,使目標細胞克隆具備可識別的特征。接著,將培養板放入細胞克隆篩選系統中,系統會自動對每個細胞克隆進行成像和分析,根據預設的篩選標準,如熒光強度、細胞形態等,識別出符合條件的目標克隆。該系統可以自動挑取這些目標克隆,轉移到新的培養環境中進行進一步的培養和驗證。

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