細胞計數對于細胞濃度和活力的可重現和準確記錄非常重要,可用于一系列研究、醫學和生物技術應用。盡管臺盼藍存在許多記錄在案的問題和局限性,但它仍然被廣泛用于許多研究實驗室。本文旨在重點介紹赤蘚紅素 B,這是一種毒性較小且無憂的臺盼藍細胞活力染料替代品。
了解臺盼藍
但首先,讓我們了解臺盼藍的局限性。該列表的最頂部是臺盼藍對人和細胞的毒性。臺盼藍會因染料吸收而隨著時間的推移降低細胞活力。建議在混合樣品后盡快計數細胞。大量研究還表明,臺盼藍具有潛在致癌性,可導致細胞周期和細胞死亡調節發生變化 (1-6)。因此,它被貼上了對動物和環境有害的標簽。
臺盼藍在儲存過程中容易沉淀,在血球計數器和/或自動細胞計數儀上計數時可能表現為碎片。保持臺盼藍的清潔需要加熱、過濾或離心以去除晶體,以避免干擾細胞計數或錯誤表征細胞。此外,細胞樣品中存在碎片使得區分無核細胞與真碎片、死細胞或晶體極為困難。由于這些限制,它可能導致個體高度主觀計數和自動細胞計數不準確。對于活力低于 80% 的樣品尤其如此。此外,臺盼藍還可以與培養基或血清中的蛋白質結合,這會干擾其與死細胞的適當結合親和力。
以上所有情況都可能導致在研究的許多關鍵點為優化或標準化用于藥物開發、細胞治療或數據生成的方案收集的數據不一致。
介紹赤蘚紅 B,臺盼藍的替代品
介紹赤蘚紅素 B,一個更好、更明亮的選擇! 赤蘚紅素 B 在國際上用作低劑量的食品添加劑,被歸類為無毒。它是一種生物安全染料,用于染料排斥測試以測量細胞活力。與臺盼藍類似,該測定基于以下原理:具有完整細胞膜的活細胞會排除染料的極性分子并保持未染色,而膜受損的死細胞則不會,因此看起來更暗。
赤蘚紅 B 細胞活力檢測依賴于與臺盼藍檢測相同的原理,其中活細胞排除染料,而受損細胞被染色。然而,與臺盼藍相比,赤蘚紅素 B 的一些優勢包括與細胞混合時毒性較低、在不同溫度和儲存條件下的穩定性以及減少血清蛋白的結合。赤蘚紅素 B 相對于臺盼藍的這些優勢顯著減少了在細胞活力和群體密度測定過程中導致細胞錯誤表征的變量。這會產生更準確和可靠的計數。
可以理解的是,一些研究人員仍然對從臺盼藍染色轉向赤蘚紅 B 染色心存疑慮,因為臺盼藍歷來是細胞計數的黃金標準方法。這通常是由于他們不愿意更改當前的協議。然而,赤蘚紅 B 可以使用相同的檢測方案、硬件和類似的儀器設置來替代臺盼藍。臺盼藍和赤蘚紅素 B 之間也沒有顯著的價格差異。
結論
赤蘚紅素 B 是臺盼藍的毒性較小的替代品,具有多種優勢,可實現更可靠的細胞計數。雖然臺盼藍是細胞計數的傳統標準品,但研究表明,赤蘚紅 B 是一種易于使用、成本效益高且毒性較小的替代品。
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