一、氫氧化細(xì)菌和鐵載體的簡(jiǎn)介：

  氫氧化細(xì)菌（Hydrogen-oxidizing bacteria）是一類(lèi)能通過(guò)氧化氫氣獲得能量，固定二氧化碳作為唯yi碳源的微生物，土壤中分布廣泛，尤其是豆科植物根際大量存在。氫氧化細(xì)菌沒(méi)有單獨(dú)的分類(lèi)，多分布在假單胞菌屬、副球菌屬、黃桿菌屬、分支桿菌屬、產(chǎn)堿菌屬、諾卡氏菌屬、醋酸桿菌屬及棒桿菌屬等。絕大部分氫氧化細(xì)菌是兼性化能自養(yǎng)型，它們可以自養(yǎng)生長(zhǎng)、異養(yǎng)生長(zhǎng)、甚至混合營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)，好氧或兼性厭氧。氫氧化細(xì)菌屬于植物根際促生菌，在農(nóng)作物增產(chǎn)方面有巨大的應(yīng)用潛力，所以其各種促生機(jī)制的研究已成為熱點(diǎn)，其中分泌鐵載體就是幾種重要的促生機(jī)制之一。

  鐵載體（siderophore）是一類(lèi)能特異性結(jié)合鐵離子并供給微生物細(xì)胞的低分子量物質(zhì)。鐵元素是微生物生長(zhǎng)的必需元素，在缺鐵的環(huán)境中微生物會(huì)分泌鐵載體螯合鐵離子滿(mǎn)足自身生長(zhǎng)需要。目前，常用的鐵載體檢測(cè)方法為Schwyn和Neilands發(fā)明的通用CAS瓊脂平板法，當(dāng)細(xì)菌產(chǎn)生的鐵載體與由鉻天青S（CAS）、十六烷基三甲基溴化銨（HDTMA）、鐵離子組成的藍(lán)色復(fù)合物結(jié)合后，會(huì)奪走鐵離子，使細(xì)菌周?chē)呐囵B(yǎng)基顏色由藍(lán)色變?yōu)殚冱S色，出現(xiàn)鐵載體分泌圈，有利于判斷細(xì)菌是否產(chǎn)生鐵載體。

二、CAS檢測(cè)培養(yǎng)基

  1. 產(chǎn)品用途：用于細(xì)菌鐵載體篩選試驗(yàn)。

  2. 配方（mg/L）：

三、試驗(yàn)方法：

  1. 稱(chēng)取本品10.87g，加熱煮沸完-全溶解于1000mL蒸餾水中，分裝三角瓶，116℃高壓滅菌30分鐘，冷卻至50℃時(shí)，傾入無(wú)菌平皿，備用；

  2. 用接種環(huán)挑取質(zhì)控菌株新鮮培養(yǎng)物點(diǎn)種到平板上；

  3. 放置35℃需氧培養(yǎng)24小時(shí)，記錄試驗(yàn)結(jié)果。

四、試驗(yàn)結(jié)果判斷：

  接種以下質(zhì)控菌株，放置于35℃需氧培養(yǎng)24小時(shí)。

圖1 銅綠假單胞菌ATCC 9027在CAS檢測(cè)培養(yǎng)基菌落特征

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