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總多糖含量檢測:技術參數與應用解析

來源:亞科因(武漢)生物技術有限公司   2025年05月30日 09:51  

總多糖的生理功能與應用領域

總多糖是生物體中廣泛存在的物質,由醛糖或酮糖通過糖苷鍵連接而成,是維持生命活動正常運轉的基本物質之一:

  • 生物體內的能量儲存與結構支持:多糖在生物體內主要作為能量儲存物質(如淀粉和糖原)和結構支持成分(如纖維素和幾丁質)。淀粉是植物體內儲存能量的主要形式,糖原則是動物體內的重要儲能物質。纖維素作為植物細胞壁的主要成分,為植物提供機械支持和結構完整性。

  • 免疫調節與生物活性:某些多糖(如果膠、葡聚糖等)具有免疫調節活性,能夠增強機體的免疫功能,提高抗病能力。例如,β-葡聚糖被廣泛用于免疫調節劑和抗腫瘤輔助治療。

  • 信號分子與細胞識別:多糖在細胞表面作為糖鏈組成部分,參與細胞識別、信號轉導等過程。糖鏈與蛋白質結合形成的糖蛋白在細胞間通訊和免疫反應中發揮重要作用。

CheKine™ 總多糖含量檢測試劑盒(微量法)的檢測原理

亞科因生物的 CheKine™ 總多糖含量檢測試劑盒(微量法)采用苯酚-硫酸法,通過顯色反應反映總多糖含量。以下是其詳細的檢測原理:

顯色反應體系

  • 多糖的水解反應:在濃硫酸作用下,多糖被水解為單糖。該步驟確保所有多糖形式均轉化為可檢測的單糖。

  • 苯酚顯色反應:水解后的單糖與苯酚試劑發生特異性反應,在高溫條件下生成橙紅色產物。該產物在 490 nm 處具有特征吸收峰,其吸光度與總多糖含量呈正比關系。

比色反應的定量基礎

  • 490 nm 波長的選擇依據:橙紅色產物在 490 nm 處具有最大吸收峰,而生物樣本中的蛋白質、核酸等成分在該波長處吸收較弱。通過高精度分光光度計測量 490 nm 處吸光度變化,可實現對總多糖含量的精準定量。

  • 線性范圍與靈敏度優化:試劑盒的線性檢測范圍為 20 - 200 μg/mL 總多糖(以葡萄糖計),相關系數 R2≥0.99,檢測限可達 5 μg/mL,滿足從植物組織到微生物培養液等多種樣本的檢測需求。

反應條件的精細控制

  • pH 與溫度的優化組合:反應體系采用濃硫酸條件,配合 25°C 室溫孵育 5 - 10 分鐘,確保多糖充分水解并與苯酚試劑充分反應。

  • 抗干擾組分的優化設計:反應體系對樣本純度有一定要求,建議對復雜樣本進行適當的預處理(如離心、透析等),以去除蛋白質、色素等可能干擾顯色反應的成分。同時,試劑盒提供了水提醇沉法提取總多糖的詳細操作步驟,確保樣本處理的標準化和一致性。

應用拓展:總多糖含量檢測的多領域解決方案

基于 CheKine™ 總多糖含量檢測試劑盒的高精度與廣泛適用性,該產品在多個領域展現出應用價值:

  • 農業科學研究:在植物生理研究中,檢測發現小麥籽粒在成熟過程中總多糖含量逐漸增加,在成熟后期達到峰值。通過檢測總多糖含量,可評估作物的成熟度和品質,為收獲時間的確定提供科學依據。

  • 食品科學與營養學:在食品質量控制中,該試劑盒用于檢測食品中的總多糖含量,確保產品符合國家標準和消費者期望。例如,在檢測某品牌燕麥片總多糖含量時,發現其含量為 68.3 mg/g,符合標聲稱含量(≥65 mg/g),為食品質量控制提供了可靠依據。

  • 醫學研究中的應用:在研究免疫調節劑時,檢測發現某種食用菌提取物中總多糖含量為 32.7 mg/g,該提取物在體外實驗中表現出顯著的免疫增強活性。通過總多糖含量的量化,為開發新型免疫調節劑提供了重要參考。

  • 海洋生物研究:在海洋生物樣本檢測中,發現一種新型海藻提取物中總多糖含量高達 450 mg/g。這種高含量的多糖具有潛在的生物活性和應用價值,如開發新型海洋生物材料和功能食品。

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