美谷分子 SpectraMax M4 多功能酶標儀介紹
一、儀器簡介
SpectraMax M4 多功能酶標儀是 Molecular Devices(美谷分子)公司推出的一款集成型多模式檢測平臺,支持吸光度、熒光強度、時間分辨熒光(TRF)、熒光偏振(FP)和發光(Luminescence)等多種檢測模式。其雙單色器設計、自動化控制系統與靈敏的光學檢測模塊,使其可廣泛應用于生命科學研究、藥物篩選、細胞功能研究、分子相互作用分析等多個領域。
作為SpectraMax M系列的一員,M4型儀器繼承了高通量微孔板檢測能力與多波長靈活選擇的特點,能為實驗室提供可靠的數據采集平臺,同時保持較高的操作簡便性和系統穩定性。
二、檢測模式與光學系統
1. 檢測模式
SpectraMax M4 提供以下五種主要檢測模式:
吸光度(Absorbance):常用于蛋白定量(如BCA、Bradford)、酶活性分析、細胞增殖實驗(如MTT、XTT)等。
熒光強度(Fluorescence Intensity, FI):用于檢測熒光探針標記樣本,如DNA定量、Ca2?探針、熒光素酶報告基因分析等。
時間分辨熒光(Time-Resolved Fluorescence, TRF):適合熒光壽命長的探針,例如歐、鋱等稀土配合物,常用于免疫分析(如DELFIA)。
熒光偏振(Fluorescence Polarization, FP):用于研究分子間結合或構象變化,如蛋白-小分子相互作用。
發光(Luminescence):適用于化學發光、熒光素酶報告系統、ATP檢測、細胞毒性分析等實驗。
2. 雙單色器光學設計
M4 酶標儀采用雙單色器設計,激發和發射波長均可在 250–850 nm 范圍內自由選擇,步進精度為 1 nm,支持窄帶和寬帶設定。這種設計比傳統濾光片系統更具靈活性,用戶可根據所用染料或試劑精細設定檢測波長,滿足個性化實驗需求。
光源方面,該儀器配備長壽命氙燈,能夠在全波長范圍內提供穩定、均勻的激發光。信號檢測采用高靈敏度光電倍增管(PMT),保證熒光和發光實驗的信號捕捉能力。
三、儀器性能參數
以下為 SpectraMax M4 的主要技術參數:
項目 | 參數說明 |
---|---|
檢測模式 | 吸光度、熒光強度、TRF、FP、發光 |
激發/發射波長范圍 | 250 – 850 nm,步進1 nm |
吸光度波長范圍 | 200 – 1000 nm |
動態范圍 | 超過 6 個數量級(具體視模式而定) |
微孔板兼容性 | 6、12、24、48、96、384 孔 |
溫控范圍 | 室溫 +4°C 至 45°C |
光源 | 長壽命氙燈(平均壽命 >1000 小時) |
檢測器類型 | 光電倍增管(PMT)和硅光電二極管(吸光度模式) |
檢測速度 | 全板檢測時間約 15–30 秒(根據模式和孔數變化) |
四、軟件系統:SoftMax Pro
SpectraMax M4 搭載 SoftMax Pro 軟件平臺,支持完整實驗流程管理,從方法建立、數據采集到分析可視化一體化操作。
軟件主要功能:
方法庫管理:預設大量常用檢測方法模板,如ELISA、酶動力學、熒光染料分析等。
實時數據采集:用戶可在實驗過程中實時監控信號變化,適用于動力學實驗。
數據處理與圖形可視化:支持標準曲線擬合、多參數統計、報告生成和曲線圖導出。
合規管理支持:提供 21 CFR Part 11 合規版本(適用于GMP/GLP實驗室),具備用戶權限管理、審計追蹤、電子簽名等功能。
五、典型應用實例
1. 酶活性分析
通過時間分辨模式或吸光度檢測,M4 可用于測定酶反應速率、抑制作用和激活機制。結合動力學模式與溫控功能,有助于獲得高質量酶動力學參數(如 Km、Vmax)。
2. 蛋白-配體結合分析
在熒光偏振檢測模式下,用戶可評估小分子藥物與靶蛋白的結合強度,為藥物篩選提供依據。該模式適用于分析結合事件引起的分子旋轉變化。
3. ATP含量與細胞活性檢測
利用發光檢測模式,可高靈敏度檢測細胞中 ATP 水平,間接反映細胞增殖和凋亡狀態,廣泛應用于細胞毒性測試和藥物效應研究。
4. 核酸定量和純度分析
M4 支持使用熒光染料(如PicoGreen)或吸光度(A260/A280)測定核酸濃度和純度,對分子克隆和基因表達研究至關重要。
5. Reporter基因表達檢測
通過熒光素酶和β-半乳糖苷酶等報告系統進行基因表達分析,M4 可實現多模式組合檢測(如 FI + Luminescence),提高數據全面性。
六、實驗通量與自動化接口
SpectraMax M4 支持與自動化系統整合,適配機械臂、液體處理工作站等高通量實驗平臺。其具備自動進樣和條碼識別接口,適合進行中等規模化藥物篩選和多條件篩查實驗。
同時,儀器配備震蕩與溫控功能,使其能勝任需溫控或攪拌反應的生物實驗,如細胞培養監測或酶促動力學反應。
七、使用與維護建議
1. 使用建議
每次實驗前進行光路校準,確保波長與信號檢測一致性;
合理設定檢測參數,防止信號飽和或信噪比過低;
使用前預熱設備,確保光源和檢測器穩定工作。
2. 日常維護
定期清潔微孔板托架與光路區域;
檢查氙燈壽命,按廠商建議及時更換;
通過標準校準板定期校正吸光度、熒光靈敏度和波長準確性;
軟件與固件升級以保持系統性能與兼容性。
八、結語
SpectraMax M4 多功能酶標儀以其集成的多模式檢測能力、靈活的波長設定以及良好的數據處理平臺,滿足了現代生物醫學研究中多樣化的實驗需求。它適用于從基礎科學研究到應用性藥物開發的廣泛場景,是實驗室構建檢測平臺的可選設備之一。
盡管市面上存在許多多功能酶標儀產品,SpectraMax M4 在波長選擇自由度、檢測范圍廣度以及軟件整合方面表現突出,可為科研工作者帶來更大的實驗設計空間與結果可靠性。
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