胃腸道負責吸收營養的重要任務,這個復雜的過程需要一個完整的屏障來允許營養物通過,同時保護宿主免受入侵微生物的侵害。為了維持和調節腸道內環境的穩定,腸道成為體內巨噬細胞含量最為豐富的器官之一 。
腸道巨噬細胞通過履行一系列且看似不協調的多樣化職責,積極地維持胃腸道的動態平衡。例如,肌肉巨噬細胞能夠通過支持腸道神經元來促進胃腸蠕動,黏膜巨噬細胞則肩負著支持口服食物抗原耐受性以及清除突破上皮屏障的病原體的雙重任務。亞上皮巨噬細胞位于上皮單層細胞的正下方,是抵抗入侵病原體的第一道防線,它們具有高吞噬性和強殺菌性,在維持組織穩態、清除病原體和調節免疫反應中發揮重要作用。血管相關巨噬細胞,不僅在粘膜部門的水平上保護免受入侵微生物的侵害,而且還需要防止病原體分布到體循環中。由此可見,功能各異的巨噬細胞群體分布于不同的解剖微環境中,包括上皮層、血管叢、腸腺、次級淋巴器官、外肌層以及腸道神經系統等。
前面介紹了用巨噬細胞清除劑(Clodronate Liposomes)在清除肺部巨噬細胞的應用情況,今天我們來分享下使用巨噬細胞清除劑(Clodronate Liposomes)清除小鼠腸道巨噬細胞的相關文章及方法。
文獻一
文章來源:N-Acetylglucosaminyltransferase V exacerbates murine colitis with macrophage dysfunction and enhances colitic tumorigenesis
巨噬細胞清除方法:在DSS給藥后的第2天和第4天,通過尾靜脈注射200 μL Clodronate Liposomes到小鼠體內,使用。(DSS誘導結腸炎/結腸癌方式可參考文章)
結果分享:

通過流式細胞術確認巨噬細胞的耗竭,結果顯示超過80%的F4/80陽性巨噬細胞被耗竭。
文獻二
文章來源:Macrophage depletion using clodronate liposomes decreases tumorigenesis and alters gut microbiota in the AOM/DSS mouse model of colon cancer
巨噬細胞清除方法:在8-10周齡時,所有小鼠腹膜內注射單劑量10 mg/kg 偶氮甲烷(AOM),指定為第0周。將DSS(生化;36,000–50,000 mw)溶解在過濾后的飲用水中,并在以下幾周內對小鼠施用 7 天:第1周(2% DSS)、第4周(1% DSS)和第7周(1% DSS)。為了消耗巨噬細胞,我們從第 6.5 周開始每周兩次腹腔注射200 μL(~1 mg) Clodronate Liposomes,直至安樂si。
結果分享:
通過細胞因子和巨噬細胞標志物的定量PCR對結腸和結腸息肉組織的基因表達譜如圖所示。在氯膦酸鹽處理組中,結腸和結腸腫瘤組織中巨噬細胞標志物F4/80均顯著降低(P<0.001和P = 0.024),證實氯膦酸鹽可有效消耗靶組織和腫瘤中的F4/80陽性細胞(圖A)。這與氯膦酸鹽處理的小鼠結腸組織中MCP-1的減少一致,MCP-1是一種強巨噬細胞化學引誘劑(P = 0.019,圖B)。
文獻三
文章來源:Depletion of muscularis macrophages ameliorates inflammation-driven dysmotility in murine colitis model
巨噬細胞清除方法:雄性FVB/Ant小鼠(100-120日齡)用含有3%葡聚糖硫酸鈉(DSS)的飲用水處理7 天,構建結腸炎模型小鼠。對于氯膦酸鹽處理,接受DSS處理的小鼠和對照動物同時在實驗方案的第四天通過尾靜脈注射200 μL的Clodronate Liposomes。
結果分享:

文獻四
文章來源:Targeting colonic macrophages improves glycemic control in high-fat diet-induced obesity
巨噬細胞清除方法:為了特異性耗竭結腸巨噬細胞,將Clodronate Liposomes體通過涂有潤滑劑的柔性灌胃針在麻醉小鼠體內進行直腸內注射。
結果分享:

野生型小鼠被喂食以椰子為基礎的高脂飲食(HFD)1周,并通過直腸內注射氯膦酸鹽(藍綠色三角形)或PBS脂質體(粉紅色圓圈)進行處理:a.腹腔內葡萄糖耐量測試 (IPGTT),IPGTT時的體重(PBS n =15,氯膦酸鹽n = 18),胰島素(PBS n = 9,氯膦酸鹽n = 11),以及胰島素耐量測試 (ITT)(PBS n = 9,氯膦酸鹽n = 5)。b.離體環境下胰島的基礎和葡萄糖刺激的胰島素分泌。c.近端結腸中的結腸巨噬細胞(c-Macs)倍數變化。
此外,不同組織中駐留的巨噬細胞有不同的給藥方法。我們將繼續整理相關文獻,為大家提供更多參考。如果您有任何特定的組織部位或巨噬細胞清除方法的需求,請在留言區告訴我們,我們會優先整理相關內容。
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