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實驗中峰形異常?可能是液相色譜柱沒有維護好!

來源:北京百歐博偉生物技術有限公司   2025年04月23日 16:39  

液相色譜柱是液相色譜儀的核心部件,正規品牌的色譜柱價格也不便宜,因此對于它的使用維護得相當重視。經常聽到小伙伴抱怨買的新色譜柱,才用了一兩個月峰形就不行了。小編認為可能不是色譜柱質量的問題,而是小伙伴沒有正確的使用沖洗導致的。下面小編就整理了一下色譜柱的安裝,使用和保存方法,大家趕緊看看吧!

 

色譜柱的安裝:

 

色譜柱在使用過程中避免強烈的碰撞和震動。各個廠家生產的色譜柱在接口尺寸上會有差異,如果柱頭類型和不銹鋼毛細管接頭兩者類型不匹配,將會產生漏液或者死體積過大的現象。接頭比柱頭深度長,不易擰緊而漏液;接頭比柱頭深度短,柱頭內留有空隙而產生死體積,使譜帶展寬和峰拖尾。

 

色譜柱的平衡和沖洗:

 

色譜柱平衡指的是用完整的分析程序,運行幾遍測試,等觀察到峰形、保留時間和峰面積穩定為止,平衡即完成。另外,在使用緩沖鹽時,應該先使用同等比例的水過渡,再將緩沖鹽引入色譜柱,以防止鹽析發生,從而損壞色譜柱。同理,使用緩沖鹽之后,一定要用較大比例的水相沖洗60min以上,將色譜柱中的緩沖鹽沖洗干凈,防止鹽析。如果不使用緩沖鹽流動相,也需要沖洗,用大比例的有機相沖洗柱內的有機物,防止其沉積影響柱效或影響下一次實驗譜圖。

 

色譜柱的保存:

 

遵守色譜柱說明書中的保持方式。在實際應用中為了方便也可以如下使用:短期保持用所用的流動相保存為佳,這樣做可以減少下次使用的平衡時間。一般情況下,建議長期用80%甲醇或乙腈來保存反相柱。純有機相保持有限度減少鍵合相水解的作用,但純甲醇(乙腈)又會將已水解而暫時吸附在柱內的鍵合相洗脫出去,使固定相流失進程加快,縮短壽命;另外,純有機相保存時,溶劑易揮發,導致柱床變干,也會容易損壞色譜柱。正相柱一般應保持在所用流動相中。

 

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