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蛋白Marker的分類

來源:上海鹿森生物工程有限公司   2025年03月24日 10:28  

蛋白Marker主要分為未預染蛋白Marker和預染蛋白Marker兩種,另外還有一些其他類型的蛋白Marker:如顯影蛋白Marker等。

未預染蛋白Marker:

是幾種已知分子量并純化好的蛋白質預混液。

非預染蛋白Marker在電泳過程中看不到,電泳結束后經過蛋白染色后才能起指示作用,無法在實驗過程中起預示作用。

但是由于蛋白沒有附帶染料分子或者是標記分子,所示大小正好是蛋白原本的大小,所以最準確。


預染蛋白Marker:

是純化好的幾種蛋白,通過與染料共價耦聯后混合在一起,在電泳過程中或者轉膜時可以直接觀察到的一種蛋白Marker。

預染蛋白Marker又可分為單色預染和多色預染。

Marker條帶越多參考價值越大,同時也越難區分,若用不同顏色則容易辨認;

單色的Marker通常利用其中某些條帶加倍濃度來提示其大小。

預染蛋白Marker在電泳過程可以起到預示作用,當觀察目標蛋白大小位置進入最佳分辨區時,停止電泳,以得到最佳分辨效果。

轉膜過程可以監測轉膜效率,同時可以在膜上標記蛋白分子量。

但是,預染蛋白Marker與染料共價偶聯,在不同的緩沖條件下,電泳遷移特性可能會發生某些變化,導致一些偏差。

也就是說,預染蛋白Marker條帶代表的是相對大小,而不是絕對大小。


顯影蛋白Marker:

顯影蛋白Marker,蛋白條帶中含有IgG結合位點,IgG結合位點會結合用于檢測靶蛋白的一抗或二抗,使得蛋白Marker在印跡膜上可與目的條帶一同呈現。

通常會有兩個預染條帶,便于動態觀察蛋白質電泳狀態,判斷轉膜效果和方向;

結合抗體后經化學發光檢測可顯示多個條帶。


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