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Todd-Hewitt瓊脂培養基原理和使用方法

來源:青島高科技工業園海博生物有限公司   2025年02月27日 15:49  

一、試驗原理:

  用于鏈球菌的分離培養。

  細菌蛋白胨、牛心浸粉提供氮源、碳源、維生素和生長因子;葡萄糖提供碳源;氯化鈉用于維持細胞滲透壓;碳酸鈉和磷酸氫二鈉提供無機鹽以及作為緩沖劑維持培養基的pH;瓊脂作為培養基的凝固劑。


二、培養基配方(g/L):

細菌蛋白胨

20.0

牛心浸粉

3.1

碳酸鈉

2.5

葡萄糖

2.0

氯化鈉

2.0

磷酸氫二鈉

0.4

瓊脂

15.0

pH值7.8±0.2(25℃)


三、試驗方法:

  1. 稱取本品45.0 g,加熱溶解于1000 mL蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。

  2. 制備質控菌液;

  3. 選擇合適稀釋度的質控菌液100 μL,均勻涂布于待測培養基上,用TSA瓊脂做對照培養基,計算回收率;

  4. 放置36±1℃需氧培養24-48小時,記錄試驗結果。


四、試驗結果判斷:

  接種以下質控菌株,放置于36±1℃需氧培養24-48小時。


質控菌株

菌株編號

接種量

(CFU)

回收率

生長情況

其他特征

溶血性鏈球菌

CMCC(B) 32210

10-100

≥70%

+++

白色小菌落

糞鏈球菌

ATCC 29212

10-100

≥70%

+++

白色小菌落

金黃色葡萄球菌

ATCC 25923

10-100

≥70%

+++

乳白色大菌落

化膿性鏈球菌

ATCC 19615

10-100

≥70%

+++

白色小菌落




圖1 Todd-Hewitt瓊脂培養基微生物質控結果




注:本文屬海博生物原創,未經允許不得轉載。


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