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蜈蚣中黃曲霉毒素等11種真菌毒素液質(zhì)質(zhì)檢測方法

來源:綠巨研科貿(mào)易(上海)有限公司   2024年08月09日 14:55  

一、藥典和測定法要求:

根據(jù)《中國藥典》2020年版規(guī)定:中藥材蜈蚣及飲片需檢測水分、總灰分和黃曲霉毒素,其中黃曲霉毒素按照真菌毒素測定法(通則2351)測定,“本品每1000g含黃曲霉毒素B1不得超過5μg,黃曲霉毒素B1,黃曲霉毒素B2,黃曲霉毒素G1,黃曲霉毒素G2的總量不超過10μg”。

真菌毒素測定法(通則2351):多種真菌毒素檢測的液質(zhì)質(zhì)法說明如下:

蜈蚣中黃曲霉毒素等11種真菌毒素液質(zhì)質(zhì)檢測方法

此方法充分利用液質(zhì)質(zhì)儀器的高靈敏度和高精確度的優(yōu)勢,一次進樣分析多種真菌毒素,大大提高了效能,節(jié)約人力和時間成本,因此越來越多地實驗室開發(fā)了多種真菌毒素檢測的液質(zhì)質(zhì)方法。

真菌毒素測定法(通則2351)中,上述篩查測定方法的前處理凈化采用傳統(tǒng)HLB柱,經(jīng)過活化、平衡、淋洗、洗脫地過程后,采用外標(biāo)法進行定量分析。此方法比采用若干種免疫親和柱的前處理凈化方法簡便許多,但仍然被困于傳統(tǒng)SPE的操作步驟,前處理步驟仍顯繁瑣。

二、FaTEx-CM 蜈蚣中真菌毒素檢測專用柱

因此我們開發(fā)出FaTEx-CM 蜈蚣中真菌毒素檢測專用柱,原理上通過填料保留雜質(zhì),所得濾液極為目標(biāo)物不需要活化平衡淋洗洗脫,操作步驟極其簡單,節(jié)省試劑、設(shè)備和耗材,因此在大大提高效率地同時,節(jié)省大量的人力和費用成本。

同時,此蜈蚣真菌毒素專用柱復(fù)合多種有效成分材料填充在凈化柱中,開發(fā)專用的操作方法平衡11種真菌毒素的回收率和RSD,經(jīng)過若干次地不懈努力,終于取得合適配方和操作步驟。通過一次FaTEx-CM蜈蚣專用柱的凈化處理,上機到LC-MSMS分析,得到的結(jié)果符合定量分析的法規(guī)要求。

三、前處理方法之蜈蚣中真菌毒素檢測專用柱

2 蜈蚣均質(zhì)后,稱取樣品2g左右

2 加一定體積V1的去離子水,靜置10分鐘

2 加一定體積V2的酸化乙腈水溶液震蕩萃取30min

2 153500 rpm離心5min

2 取一定體積的上清液V3倒入FaTEx-CM_2vac專用柱,每秒1滴流出

2 收集全部濾液,取一定體積V4的濾液,加一定體積V5的去離稀釋

2 0.22µm filter過濾后上機LC-MS/MS分析

四、儀器分析方法

蜈蚣中黃曲霉毒素等11種真菌毒素液質(zhì)質(zhì)檢測方法蜈蚣中黃曲霉毒素等11種真菌毒素液質(zhì)質(zhì)檢測方法

五、11種真菌毒素的清單,歡迎聯(lián)絡(luò)詢問回收率和RSD

英文名稱

中文名稱

樣品濃度 (ng/g)

Aflatoxin B1

黃曲霉毒素B1

5

Aflatoxin B2

黃曲霉毒素B2

5

Aflatoxin G1

黃曲霉毒素G1

5

Aflatoxin G2

黃曲霉毒素G2

5

Deoxynivalenol

嘔吐毒素

50

Fumonisin B1

伏馬毒素B1

200

Fumonisin B2

伏馬毒素B2

200

Ochartoxin A

赭曲霉毒素A

5

T-2 toxin

T-2毒素

10

Zearalenone

玉米赤霉烯酮

50

HT-2 toxin

HT-2毒素

50



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