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1.消毒物品的初步處理，凡接觸過(guò)病原微生物的醫(yī)療器械、被單、衣物等均應(yīng)先用化學(xué)消毒劑進(jìn)行消毒。常規(guī)清洗時(shí)，先用洗滌劑溶液浸泡擦洗，去除物品上的油污、血垢等污物，然后用流水沖凈。有軸節(jié)、齒槽和縫隙的器械和其它物品，應(yīng)盡可能張開或拆卸，進(jìn)行洗刷。洗滌后的物品應(yīng)擦干，按臨床需要分類包裝，以免再污染。清除污染前后物品的容器和運(yùn)送工具應(yīng)嚴(yán)格區(qū)分，以防交叉感染。
3.消毒物品裝放應(yīng)合理，盡量將同類物品裝在同一鍋內(nèi)滅菌。物品裝放時(shí)，上下左右均應(yīng)交叉錯(cuò)開，留出縫隙，使蒸汽容易穿透。大消毒包應(yīng)立著放上層，小包放下層，布類和金屬類物品同時(shí)滅菌時(shí)，應(yīng)將金屬類物品包放在下層，使兩者受熱基本一致，并防止金屬物品滅菌中產(chǎn)生的冷凝水弄濕包布。
4.排盡空氣，使用高壓蒸汽滅菌器時(shí)，最關(guān)鍵的是將鍋內(nèi)空氣排盡。關(guān)閉放氣閥，通電后，待壓力上升到0.05MPa時(shí)，打開放氣閥，放出空氣，待壓力表指針歸零后，再關(guān)閉放氣閥。關(guān)閥再通電后，壓力表上升達(dá)到0.1MPa時(shí)，開始計(jì)時(shí)，維持壓力到指ding的時(shí)間。
5.合理計(jì)算滅菌時(shí)間，穿透時(shí)間，從鍋內(nèi)達(dá)到滅菌溫度開始到鍋內(nèi)最難達(dá)到的部位也達(dá)到此溫度所需要的時(shí)間；維持時(shí)間，即殺滅微生物所需要的時(shí)間，一般以殺滅嗜熱脂肪桿菌芽胞所需時(shí)間來(lái)表示；安全時(shí)間，為使滅菌得到確切保證所需要增加的時(shí)間，一般為熱死亡時(shí)間的一半，其長(zhǎng)短視消毒物品而定。
6.開蓋操作，達(dá)到滅菌時(shí)間后即可切斷電源，在壓力降到0.05MPa，可緩慢放出蒸氣，注意不要使壓力降低太快，以致引起激烈的減壓沸騰，使容器中的液體四溢。當(dāng)壓力降到零后才能開蓋，取出培養(yǎng)基擺在平臺(tái)上以待冷凝，不可久不放氣，否則容易引起培養(yǎng)基成分變化以至無(wú)法制作斜面培養(yǎng)基。
7.滅菌后操作，要求消毒物品干燥后檢查指示劑，當(dāng)達(dá)到滅菌要求時(shí)可出鍋。取無(wú)菌物品時(shí)，要嚴(yán)格無(wú)菌操作，開蓋物品先將蓋蓋好，貯槽關(guān)閉好通氣孔。同時(shí)應(yīng)分類放置，順序發(fā)放取用。
8.防止超熱蒸汽，超熱蒸汽溫度雖高，但像空氣一樣，遇到消毒物品時(shí)不能凝成水，不能釋放潛熱，所以對(duì)滅菌不利。防止超熱的辦法是使用外源蒸汽滅菌器時(shí)，不要使夾層的溫度高于消毒室的溫度，兩者應(yīng)相近不要使壓力過(guò)高的蒸汽進(jìn)入消毒室內(nèi)；滅菌時(shí)不要先用壓力高的蒸汽加熱到要求溫度，然后再降至正常壓力。
9.高壓滅菌后不變質(zhì)的物品，如無(wú)菌水、栽培介質(zhì)、接種用具，可以延長(zhǎng)滅菌時(shí)間或提高壓力。而培養(yǎng)基要嚴(yán)格遵守保壓時(shí)間，既要保壓，又要防止培養(yǎng)基中的成分變質(zhì)或效力降低，不能隨意延長(zhǎng)時(shí)間。
10.含有鹽分的液體漏出或溢出時(shí)，一定要及時(shí)擦干凈，沿著蓋子的密封圈要擦干，否則會(huì)腐蝕容器和管道。
11.不要在爆炸性氣體附近使用儀器。
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