方法選擇合適色譜柱，流動(dòng)相A為水，流動(dòng)相B為乙腈，梯度洗脫0～3min，檢測(cè)波長(zhǎng)260nm，柱溫35℃，進(jìn)樣量10μL。以保留時(shí)間定性，峰面積定量，計(jì)算蟲草素含量。精密量取蟲草素對(duì)照品4.76mg，置入10mL量瓶，加水適量，使溶解，用水稀釋至刻度，制成濃度為0.476mg／mL的對(duì)照品貯備液，取貯備液1.0mL，置入10mL量瓶，加水定容至10mL，得濃度47.6μg／mL的蟲草素對(duì)照品溶液。

準(zhǔn)確稱取冬蟲夏草1g，用1％乙酸溶液浸泡過夜，37℃超聲提取30min，過濾，收集濾液并用1％乙酸溶液定容至10mL。取2mL，加入乙腈2mL，沉淀蛋白，離心，取上清凍干，加水1mL溶解，0.45lam微孔濾膜濾過得到供試品溶液，待測(cè)。

供試品溶液進(jìn)樣測(cè)定，得到色譜峰。對(duì)線性關(guān)系精密度、重復(fù)性穩(wěn)定性依次進(jìn)行檢測(cè)。以進(jìn)樣濃度為橫坐標(biāo)(x)，峰面積為縱坐標(biāo)(y)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程和相關(guān)系數(shù)得到在范圍內(nèi)的濃度與峰面積呈良好線性關(guān)系，計(jì)算蟲草素的峰面積RSD表明實(shí)驗(yàn)的精密度良好穩(wěn)定性質(zhì)良好。

準(zhǔn)確稱取已知蟲草素含量的冬蟲夏草樣品6份，分別精密加入47.6μg／mL的蟲草素對(duì)照品溶液0.5mL，將供試品溶液，按調(diào)試好的色譜條件測(cè)定，計(jì)算回收率。取冬蟲夏草藥材，將供試品溶液，按調(diào)試好的色譜條件測(cè)定。得到不同產(chǎn)地冬蟲夏草蟲草素的含量。

利用蟲草素的理化性質(zhì)，方法選用乙腈-水作為流動(dòng)相系統(tǒng)，梯度洗脫分離蟲草素，可以將蟲草素與雜質(zhì)進(jìn)行很好的分離，色譜峰的對(duì)稱度和分離度較好，峰形窄且對(duì)稱。高效液相色譜技術(shù)不斷發(fā)展成熟，相關(guān)的檢測(cè)研究日漸增多。實(shí)驗(yàn)室遵照ISO17025和GMP進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室管理，專注為藥品生產(chǎn)過程中可能產(chǎn)生的雜質(zhì)提供評(píng)估報(bào)告、方法開發(fā)、驗(yàn)證及樣品檢測(cè)等一系列完整的解決方案。更多檢測(cè)問題歡迎私信及評(píng)論區(qū)留言！

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