近年來,由深圳市耐思特科學儀器有限公司研發人員對發光細菌的研究和應用做了大量的工作,成功研制出了水質急性生物毒性在線分析儀綜合水體毒性的測試儀器,并建立了發光細菌法生物毒性測試系統,為發光細菌毒性檢測技術的發展奠定了基礎。
水質急性生物毒性在線分析儀檢測技術是建立在細菌發光生物傳感方法基礎上的毒性檢測技術,利用靈敏的光電測量系統測定毒物對發光細菌發光強度的影響,能有效地檢測突發性或破壞性的環境污染。有毒的化學 物質、重金屬離子、抗生素、化學治療劑、農藥等污染物質都會影響細菌發光,所以可以用發光細菌作為敏 感的指示物,測定有毒物質。
這類物質抑制細菌發光的途徑有兩個:一是直接抑制參與發光反應的酶類活性;另一是抑制細胞內與發光反應有關的代謝過程。 因此,能夠干擾或破壞發光細菌呼吸、生長、新陳代謝等生理過程的任何有毒物質都可以根據發光程度的根據測定結果判定毒性待測樣品急性毒性的大小,其判定標準有3個:
①有毒、無毒;
②百分數等級;
③對數等級。
國內水質急性生物毒性在線分析儀多釆用百分數等級,百分數等級可 根據相對發光率的大小及等當量HgCL溶液濃度判定 待測樣品的毒性大小,也可以用EGo判定待測樣品的毒性大小,具體如表1、表2所示。
表1相對發光率毒性百分數毒性等級變化測定。
一、基于細菌發光法的快速水質毒性分析儀
1.水質毒性的評定指標
發光細菌毒性通常以相對發光率、相對抑光率、
ECjo表達,其表達公式如下:
相對發光率=
樣品光強度 對照光強度
xlOO%
相對抑光率=
對照光強度-樣品光強度
對照光強度
xlOO%
ECjo為相對抑光率達到50%時的樣品濃度(或稀 釋度)。
2.水質毒性分析儀的分析方法及原理
本文以在線監測儀為例,儀器主要有發光細菌培養裝置、光電檢測裝置、數據處理部分及數據顯示部分。分析方法是先將某種發光細菌凍干粉在配置好的營養液中活化,活化時間因細菌不同而不同。通常儀器有兩個檢測 通道,一路用于檢測空白對照樣品,另一路檢測被測樣 品。兩路同時與培養好的發光細菌混合,通過生物發光檢測裝置分別測量出發光強度值和7,,這樣就可 以計算樣品的相對抑光率(H)和相對發光率(£):
H(%)=(l-#)xl00%
£(%)=-^-xl00%
A)
需要注意的是,對照樣和待測樣所加入的發光細 菌液一定要等量,測量溫度要保持一致,如果測定包 括pH值影響在內的急性毒性,不應調節水樣pH值。 如果要測定排除pH值影響在內的急性毒性,需將對 照樣品pH值調節到與待測樣品一致。
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