elisa試劑盒用多少血清及其試驗步驟

 elisa試劑盒為什么要用血清檢測？

而elisa試劑盒需要用多少血清檢測呢？

ELISA其實是可以測一些組織、細胞等樣本的,但是由于組織、細胞是固體樣本,要對其進行破碎,提取被檢物質；而在提取被檢物質時破碎方式（如機械破碎、超聲破碎、裂解液裂解等）、提取液的成份等存在差異,*終導致提取程度有所差異,從而難以建立正常參考值；而血清或血漿樣本就不存在因提取過程導致的偏差并且采集時又非常方便,因此通常臨床常采用血清、血漿做為檢測對象。

明白了elisa試劑盒盒為什么要用血清檢查，同時在ELISA試劑盒試驗血清為何要稀釋？有兩個原因：

1，競賽按捺對比顯著，應稀釋競賽物；
2，以下降非特異性反響，使特異性的抗原抗體反響充分體現出來。
血清稀釋用通常的PBS即可，可加1％的BSA，能有用下降ELISA本底，當然假如你嫌費事我覺得用生理鹽水代替PBS也不大。不論你是用直接競賽還是直接競賽，血清的稀釋倍數必定要事前確定，但也不必一點點，你做一個預試驗即可，挑選OD在1.0左右的稀釋倍數，即你的ELISA中陰性孔OD在1.0，這么作出來的曲線對比靈敏。

ELISA試劑盒試驗稀釋血清的步驟：

先把蛋白稀釋必定的倍數，比如說10倍、20倍稀釋（這么能夠大體確定一個參數），將抗原進行一系列稀釋包被微量反響板，再用必定稀釋度的陽性參閱血清和陰性參閱血清進行孵育后洗刷，再加酶物進行反響，經孵育洗刷后，加底物溶液顯色，停止反響后別離測定O.D值，挑選O.D值≥1.0的那個抗原稀釋度為zui適包被濃度。通常老是要挑選那個O.D值稍大于1.0，而不挑選小于1.0的抗原濃度。陰性參閱血清O.D值請求<0.1-0.2。也就是請求陽性參閱血清和陰性參閱血清的O.D值有顯著差別。

上海琛藝具有完善的試驗技能開發平臺，成熟的抗原、抗體研制體系，熟練掌握各種酶聯技能，公司的研制團隊，能夠有用的確保公司商品強的穩定性和高的準確性，一起又具有zui有競賽力的報價。公司目前能夠提供生化試劑、分子生物學試劑及試劑盒，各種抗體及免疫學試劑盒、試驗耗材等多類別上萬種商品，商品觸及分子生物學、細胞生物學、免疫學等生命科學的各個領域。

使用注意事項：

1、Elisa試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2、濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。

3、各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。

4、請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔孔OD值的)，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定，計算時請*后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

5、嚴格按說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

6、本試劑不同批號組分不得混用。

7、封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

8、所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9、底物請避光保存。

標簽：elisa測血清還是血漿