ELISA試劑盒|elisa試劑盒上海

試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)，已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。試劑盒的產(chǎn)生正是為了使實(shí)驗(yàn)人員能夠擺脫繁重的試劑配制及優(yōu)化過程，所以試劑盒中一般配備有相應(yīng)的使用說明書，用戶按照說明書不需或只需少量的優(yōu)化即可得到滿意的結(jié)果。操作步驟是試劑盒說明書中zui重要的部分，內(nèi)容應(yīng)準(zhǔn)確、簡潔、易懂，排版上操作步驟使人一目了然，操作步驟為試劑盒的靈魂。

完整的試劑盒包含以下各組分：

陰性對照品和陽性對照品(定性測定中)，參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測定中)；

酶的底物；

結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液；

酶反應(yīng)終止液，常用的HRP反應(yīng)終止液為硫酸，其濃度按加量及比色液的zui終體積而異，在板式中一般采用3mol/L。

酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物)；

洗滌液，在板式中，常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水；

已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑)；

ELISA試劑盒|elisa試劑盒上海

免疫測定技術(shù)的基礎(chǔ)在于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應(yīng)，所以任何的診斷試劑離不開的原料，如抗原抗體，酶等。以前用于免疫測定的抗原通常為各種純化抗原，而抗體則為純化抗原免疫動物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體，而抗原或抗體的標(biāo)記物如酶標(biāo)結(jié)合物則通過各種化學(xué)合成方法制備。近年來，隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結(jié)合物等免疫測定試劑幾成為現(xiàn)實(shí)的新一代試劑，各種新型使用的測定方法也不斷出現(xiàn)。

HBsAg試劑特點(diǎn)（檢測模式：臨床抗體夾心法）：包被抗體為山羊多抗。多抗具有高親和性和對抗原各種表位的反應(yīng)性。酶表抗體為與HBsAg有不同結(jié)合位點(diǎn)的鼠復(fù)合單位，可測得HBsAg變異樣品，提高檢測的特異性（99.98%）提高檢測的靈敏度，應(yīng)用Parl Ehrich 學(xué)說（PEI）HBsAg標(biāo)準(zhǔn)品，對ad標(biāo)準(zhǔn)品的靈敏度為0.05ng/ml對ay標(biāo)準(zhǔn)品靈敏度為0.025ng/ml

ELISA檢測試劑盒應(yīng)用定性夾心免疫檢測技術(shù)，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條，這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強(qiáng)的肽段，分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中并孵育，如果其中存在HEV IgM抗體，這些抗體就會與HEV 的多肽抗原結(jié)合，并固定在上面，洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP（辣根過氧化物酶）酶結(jié)合物，經(jīng)第二次孵育后，酶結(jié)合物就會與次孵育結(jié)合上的HEV IgM抗體相結(jié)合，洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物，加入TMB底物溶液，在第三次孵育時會發(fā)生酶-底物反應(yīng)，只有那些含有HEV IgM抗體和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會發(fā)生顏色變化，加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應(yīng)，并在波長: 450nm處測量O.D.值,按照本HEV IgM抗體elisa試劑盒的測試標(biāo)準(zhǔn), O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認(rèn)為是初試

ELISA試劑盒組成

注：標(biāo)準(zhǔn)品（S0-S5）濃度依次為：0、30、60、120、240、480 U/ml