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色譜是一種分離分析手段，分離是核心，因此擔負分離作用的色譜柱是色譜系統的心臟。對色譜柱的要求是柱效高、選擇性好，分析速度快等。市售的用于HPLC的各種微粒填料如多孔硅膠以及以硅膠為基質的鍵合相、氧化鋁、有機聚合物微球（包括離子交換樹脂）、多孔碳等，其粒度一般為3,5,7,10μm等，柱效理論值可達5~16萬/米。對于一般的分析只需5000塔板數的柱效；對于同系物分析，只要500即可；對于較難分離物質對則可采用高達2萬的柱子，因此一般10~30cm左右的柱長就能滿足復雜混合物分析的需要。
色譜柱是液相色譜儀較為主要的部件，被測物質能否被很好的分離和測定，色譜柱的性能起著決定性的作用。因此，在日常工作中，應特別留意色譜柱的正確使用和維修保養，以延長色譜柱的使用壽命。
安捷倫液相色譜柱的保養注意事項：
(1)使用預柱和保護柱。預柱(pre-column)安裝于泵和進樣器之間，它給色譜柱中的活動相提供了*的平衡，并防止了對柱填料有破壞作用的組分或污染物進進色譜柱。保護柱(guardcolumn)可以阻擋能夠牢固地吸附于色譜柱上的組分進進色譜柱，保護柱應與色譜柱的填料相同。預柱和保護柱可以經常更換，而不需要經常更換色譜柱，這就延長了色譜柱的使用壽命。
(2)防止氣體進進色譜柱。有些色譜柱(如凝膠柱)是不答應氣泡進進的，否則將會使柱效降低甚至形成微小的難以驅除的氣室。因此，為了防止氣泡進進色譜柱，一定要使用經過脫氣的活動相，并且要嚴格按照下列步驟來安裝色譜柱。a.拆卸下色譜柱進口處的密封螺絲，觀察是否有溶劑滲出；b.如有溶劑滲出，即可將色譜柱接到管路上，以避免氣泡的進進；c.如無溶劑滲出時，表明色譜柱的此端已經進往空氣了，此時，可將色譜柱的出口端接到進樣閥上，以活動相來反方向沖洗色譜柱，以便將柱內的空氣排除。建議以0.2ml/min的小流量來沖色譜柱，假如溶劑的流速太快或者是壓力忽然的上升都將會導致柱性能的降低；d.假如流出的溶劑里不含有氣泡，說明柱內的氣體已經被排出了，再將色譜柱以正確的方向接好，這樣氣泡就進不到色譜柱里面了。
(3)安捷倫液相色譜柱的清洗。為了不使被測物質和雜質停留在色譜柱中，在每次的樣品分析工作完成之后，都應及時地清洗色譜柱。首先要用對被測樣品洗脫能力強的溶劑來洗脫色譜柱，以分析工作中常用的反相色譜分析法為例，因其先流出的物質是極性大的物質，此時應用100%的甲醇或使用異丙純、四氫呋喃等極性稍弱的溶劑將吸附在柱內的極性小的物質洗脫下來，洗脫液的用量一般為柱體積的20倍即可。假如活動相是緩沖溶液，則應先用蒸餾水來沖洗色譜柱，以沖掉柱內的鹽，然后再用合適的溶劑來沖洗。
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