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色譜柱清洗與保存

來源:深圳市諾亞迪化學科技有限公司   2018年06月25日 18:31  

色譜柱峰形發(fā)生改變、色譜峰分叉、出現(xiàn)肩峰、保留時間漂移、分離度變化或背壓升高,都表明色譜柱被污染了。用純有機溶劑進行沖洗以去除非極性污染物,謹慎操作以避免任何緩沖鹽的析出。如果沖洗不能解決問題,可采用以下步驟對色譜柱進行清洗和再生。
■ 使用與樣品性質(zhì)和固定相類型(反相、正相或HILIC)相匹配的常規(guī)清洗方法,這有助于溶解可疑污染物。
■ 在柱溫45 °C條件下,使用20倍柱體積的溶劑沖洗色譜柱。
■ 如果使用的是反相色譜柱,依次以非極性逐漸增強的溶劑(如,水到甲醇到四氫呋喃*到二氯甲烷*)沖洗色譜柱。如果使用的是HILIC色譜柱,依次以極性逐漸增強的有機溶劑(如,乙腈到乙腈/甲醇到乙腈/水到水)沖洗色譜柱。
*注意:對于某些有機溶劑,需要注意其與系統(tǒng)管路與真空脫氣包的兼容性。
■ 通過逆向沖洗程序,再返回初始流動相條件。
如果確認樣品或流動相存在污染跡象,或是分析條件或樣品項目對色譜柱的損害不可避免,更好的色譜柱使用與維護方式包括如下:
■ 參考“流動相及樣品的制備及建議”部分
■ 增加清洗頻率,包括:在每個分析梯度末端增加“清洗步驟”,或是,一定的進樣針數(shù)后進行較為*的清洗
■ 使用保護柱,專柱,并定期更換(當柱壓增加10%,或柱效下降10%時)反相與HILIC色譜柱的保存
如需將色譜柱放置超過四天,應將其保存于100%乙腈中。對于高溫條件下的分離,應在使用后立即保存于100%乙腈中,切勿將色譜柱保存于緩沖液中。如果流動相中含有緩沖鹽,則先用10倍柱體積95%純水沖洗色譜柱用以*清除柱內(nèi)的鹽成分,再用10倍柱體積的乙腈沖洗柱。將色譜柱*密封,防止溶劑蒸發(fā)而導致柱床變干。
 

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