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諾氟沙星含量測定

閱讀：5617發(fā)布時(shí)間：2012-3-30

 

一、實(shí)驗(yàn)方法
Cometro液相色譜系統(tǒng)；
紫外檢測器波長：278nm；
Kromasil C18 250*4.6mm 5u 色譜柱；
柱溫：25℃；
流動(dòng)相：0.025mol/L磷酸溶液（用三乙胺調(diào)pH=3.0）：乙腈=87:13；
流速：1.00ml/min；
諾氟沙星對(duì)照品-0.15mg/ml，樣品；
進(jìn)樣量：對(duì)照品分別進(jìn)樣5ul，7.5ul，10ul，12.5ul，15ul各3次，樣品進(jìn)樣10ul，使樣品與標(biāo)準(zhǔn)品1:1混合再進(jìn)樣10ul，考察線性相關(guān)性，保留時(shí)間重現(xiàn)性，回收率。
二、譜圖結(jié)果
 
 

 

 
附進(jìn)樣量，保留時(shí)間，峰面積關(guān)系表：

進(jìn)樣量
保留時(shí)間/min
峰面積/103
標(biāo)準(zhǔn)品5ul
10.533
728.12
標(biāo)準(zhǔn)品7.5ul
10.541
979.1
標(biāo)準(zhǔn)品10ul
10.528
1230.741
標(biāo)準(zhǔn)品12.5ul
10.524
1460.44
標(biāo)準(zhǔn)品15ul
10.401
1732.42
樣品10ul
10.517
1029.987
樣品標(biāo)準(zhǔn)品1比1混合10ul
10.213
1120.78

 
三、結(jié)果運(yùn)算
1、保留時(shí)間重現(xiàn)性考察：

保留時(shí)間
10.533
10.541
10.528
10.524
10.401
RSD
0.5588%
             

 
2、線性相關(guān)性考察及樣品含量計(jì)算：
以標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，得線性方程：

 
由此可算出樣品中諾氟沙星含量0.1205mg/ml。
3、回收率考察：
根據(jù)上面線性方程可算出混合后樣品含諾氟沙星0.1342mg/ml，而實(shí)際真值是0.1352mg/ml，因此得回收率為99.20%。
四、綜述
1、此三項(xiàng)考察綜合考察了Cometro 6000 PVW UV/VIS檢測器的吸收穩(wěn)定性，Cometro 6000 LDI泵的流量性，進(jìn)樣伐、進(jìn)樣針的性，Kromasil色譜柱的性。
2、本實(shí)驗(yàn)流動(dòng)相中三乙胺看似作用是調(diào)節(jié)pH，其實(shí)際zui大作用是調(diào)整峰型，因?yàn)橹Z氟沙星有含氮性基團(tuán)，在酸性環(huán)境中容易與色譜柱中的硅羥基產(chǎn)生靜電作用而拖尾，如下圖：
而三乙胺可以代替物質(zhì)與硅羥基作用，了物質(zhì)的峰型。因此調(diào)節(jié)pH時(shí)候得注意三乙胺的加入量，不能過少，可以直接加入適量三乙胺，再用磷酸調(diào)節(jié)pH。

 

 


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