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HPLC系統(tǒng)的酸清洗和鈍化

閱讀:3690        發(fā)布時(shí)間:2008-4-28

30%磷酸水溶液通過酸反應(yīng)和強(qiáng)表面活性劑/洗滌劑的共同作用,可以有效地清潔不銹鋼及其它潤濕的部件。這一方法比更常用的硝酸“鈍化"更有效、且較少損害特別是對(duì)日常使用低紫外波長的應(yīng)用來說。這一磷酸清洗步驟不是起鈍化作用,但它是系統(tǒng)鈍化前清洗的*步。
     一般來說,對(duì)于陽離子的離子色譜分析或配有氧化方式的電化學(xué)檢測器以外的應(yīng)用不需要鈍化系統(tǒng)。因?yàn)橛姓婵彰摎鈾C(jī)每個(gè)通道體積為8m1,可不*磷酸;中洗全部通道。如果你計(jì)劃四個(gè)通道都要用,則可用濕灌注的方式以4mL/min流速對(duì)每個(gè)通道清洗8~1 O分鐘來清洗脫氣機(jī)。這一步完成后你必須*淋洗管路,用水淋洗2~3次以便將磷酸從溶劑過濾頭等部件沖洗凈。
     安裝好的HPLC系統(tǒng)的酸清洗和鈍化
     HPLC系統(tǒng)內(nèi)部可能的污染物來自人的觸摸,暴露在實(shí)驗(yàn)室化學(xué)環(huán)境,與零部件制造相關(guān)的殘留物,或來自先前的流動(dòng)相和樣品的殘余物。
     雖然系統(tǒng)自身也會(huì)逐步地被流動(dòng)相清洗,但某些釋放出的雜質(zhì)會(huì)吸附在色譜柱上以及檢測器潤濕的表面上,因而會(huì)降低總的性能。
     磷酸清洗:
     通常用于從系統(tǒng)中除去有機(jī)雜質(zhì)。可能是由于洗滌作用,它似乎比強(qiáng)有機(jī)溶劑更好也更快。這一步清洗必須在硝酸鈍化之前完成。
     硝酸鈍化:
     實(shí)際上是作用于不銹鋼表面,在表面上生成均勻的氧化層。這層氧化膜保護(hù)不銹鋼免受腐蝕鹵化物,螯合劑,等等并且盡量減少浸出的金屬離子進(jìn)入流動(dòng)相。
     以下應(yīng)用需要在使用前做磷酸清洗和硝酸鈍化,包括:
     ①所有的氨基酸分析系統(tǒng);
     ②所有包含電化學(xué)檢測器的系統(tǒng);
     ③所有要分析無機(jī)陽離子,包括過渡金屬的系統(tǒng);
     ④所有利用柱后添加衍生試劑或絡(luò)合樣品組分的系統(tǒng)。
    
     以下應(yīng)用需要在使用前只做磷酸清洗,包括:
     ①所有常規(guī)用途的、可能在低pH環(huán)境下在低紫外檢測波長下運(yùn)行的HPLC系統(tǒng);
     ②所有需要高靈敏度性能的梯度紫外檢測系統(tǒng)。
     系統(tǒng)清洗指南:
     注意:在實(shí)行這個(gè)程序時(shí)采用適當(dāng)?shù)陌踩雷o(hù)措施準(zhǔn)備工作:
     首先,摘下色譜柱,用兩通或接頭取代色譜柱。在實(shí)行這一清洗步驟時(shí),如果有可能選擇監(jiān)測的紫外波長為:254nm。通過軟件或移去電纜的方式取消紫外檢測器的自動(dòng)回零功能。
     具體步驟:
     1、用甲醇*沖洗系統(tǒng),以等比例方式通過泵的所有管路。
     2、用水*沖洗系統(tǒng),以等比例方式通過泵的所有管路。
     3、以等比例方式通過泵的所有管路導(dǎo)入~30%v/v磷酸水溶液。以1mL/min流速洗大約一個(gè)小時(shí)。在沖洗期間活動(dòng)所有的閥,包括:參比閥、進(jìn)樣閥及旁路閥等等。
     4.用水*沖洗所有管路和系統(tǒng)。
     必要時(shí)用6N硝酸HN03重復(fù)以上步驟。否則,跳到第7步。注意:硝酸是一個(gè)強(qiáng)紫外吸收溶液。除非需要,不要做鈍化程序。
     5.以等比例方式通過泵的所有管路導(dǎo)人6N硝酸水溶液大約是40%。以1mL/min流速洗大約一個(gè)小時(shí)。
     6.用水*沖洗系統(tǒng),仔細(xì)檢查是否有任何滲漏,在沖洗期間反復(fù)活動(dòng)所有的閥,包括:參比閥、進(jìn)樣閥及旁路閥等等。
     注意:如果你要用低于270nm的紫外波長作檢測,則需要更大量水的清洗過程,不斷的換新鮮水并活動(dòng)各個(gè)閥沖洗進(jìn)樣器,等以便從系統(tǒng)中除去所有的痕量硝酸根離子。硝酸清洗后經(jīng)常在幾天之內(nèi)都會(huì)觀察到在低紫外波長下有負(fù)的基線漂移。勤換水和有耐心是盡快消除紫外本底的關(guān)鍵。
     7.返回到甲醇洗,然后繼續(xù)用實(shí)驗(yàn)所需的溶劑沖洗。
     8.通過軟件或接上電纜的方式重新使紫外檢測器的自動(dòng)回零功能恢復(fù).

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