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液相色譜柱常見故障及排除

閱讀:4294        發(fā)布時間:2008-6-25
詳細說明:

  
  
 柱壓升高 色譜柱入U濾片被流動相或樣品中顆粒堵住。
樣品組分在濾片上沉淀堵住濾片。 卸下入口接頭的濾片,使用1:1的硝酸溶液超聲清洗5min,再用水、
甲醇清洗除去水份。
樣品及流動相使用0.45µm濾膜除去微量雜質(zhì)。
使用流動相作溶劑配制樣品。  
 新柱柱效低 柱外死體積大。
樣品在流動相中溶解不好,影響傳質(zhì)過程。 更換連接管,重新連接色譜柱,降低死體積。
使用合適的流動相或使用流動相溶解樣品。  
 舊色譜柱柱效低,分離不好,柱入口床層塌陷。 填料被流動相溶蝕而流失。 用同型填料填補柱效可部分恢復。
對硅膠質(zhì)填料,流動相PH值在2—7范圍內(nèi),否則可能被溶蝕。  
 舊色譜柱柱效低分離不好,有時出現(xiàn)雙峰。 入門填料被污染變質(zhì)所致。 用強溶劑沖洗。
刮除被污染的床層,用同型的填料填補柱效可部分恢復。
污染嚴重,則廢棄或重新填裝。  
 新柱接到儀器上后,柱頭漏液。 柱接頭與儀器之間連接管的壓環(huán)變形量不夠。 用扳手順時針方向擰緊1/4圈直到不漏液為止。  
 新柱接到儀器上后,啟動儀器沒有柱壓降。 柱放置時間過長柱內(nèi)充裝的液體己揮發(fā)干。 繼續(xù)開泵,用流動相將柱內(nèi)氣體置換掉。  
 新柱接到儀器上后,檢測器出口不斷有小氣泡出
現(xiàn)。 ①同上。
② 流動相脫氣不*特別是MeOH/H20體系由于氫鍵作用很容易出現(xiàn)氣泡。 ①同上。
②配好流動相后一定要進行脫氣處理。  
 新柱接到儀器上后柱壓降不斷增加,甚至超過儀器的耐壓限。 柱入口濾片被固體顆粒堵塞或被毒
菌堵塞。 更換或清洗柱入口濾片;用0.45µm過濾膜過濾流動相除去微小顆粒物。  
 進樣次數(shù)增加柱壓降逐漸增加。 ①樣品中含有不溶于流動相的微小顆粒物。
②樣品在流動相中析出微小結晶。 ①用0.45µm過濾膜過濾樣品。
②推薦使用流動相溶解樣品。  
 使用—段時間后,柱效下降,分離不好。 ①柱填料被流動相溶解而流失。
②柱填料被樣品雜質(zhì)污染。 ①推薦使用予柱。如柱床層塌陷,用相同型號填料填補。
②推薦使用保護柱或用強溶劑沖洗色譜柱除去污染雜質(zhì)。  
 柱使用一段時間后,柱效下降出現(xiàn)雙峰。 柱入口床層被污染使柱填料變質(zhì)。 用強溶劑沖洗除去雜質(zhì)。  
 柱使用—段時間后,柱效下降,出現(xiàn)峰拖尾。 柱入口床層被污染。 用強溶劑沖洗20-30ml,若效果不明顯應廢棄。  
 進樣量增大與峰面積增加不成正比.即進樣量與峰面積不是線性關系。 樣品在流動相中的溶解度小,只有部分樣品被流動相沖如色譜柱中而另一部分則沉積在柱人口端。 ①用流動相溶解樣品。
②樣品的濃度不宜太大。
④進樣量不宜過大。  
 使用緩沖液作流動相時,柱壓降升高很快。 霉菌生長所致。 ①在流動相中加入有毒物質(zhì)或加疊氯化鈉防止霉菌生長。
②實驗結束后先用純水后用MeOH各沖洗20-30ml后關機。  
 用5µm顆粒填料柱時, 以MeOH/H20作流動相柱壓較高。 MeOH與水之間由于氫鍵作用黏度增大。 可用乙腈/水體系使柱壓降低,分離效率更好。  
 長時間放置的色譜柱,出現(xiàn)雙峰。 柱床層出現(xiàn)干裂。 柱放置時,使用相應的溶劑充填好,防止受大的機械震動,如床層干裂應廢棄掉。  
 流動相洗滌強度由弱漸強時出現(xiàn)很多雜質(zhì)峰。 強溶劑將弱溶劑洗不出的雜質(zhì)沖出來。 不影響柱的性能。  
 柱使用一段時間后保留值逐漸縮短。 柱中固定相流失所致。 ①更換色譜柱。
②檢查所用的色譜條件是否合適。  
 在U V色譜圖中,靠近死時間處出現(xiàn)負峰。 ①進樣時壓力波動所致。
②樣品溶劑比流動相的UV吸收值低。 ①采用閥進樣。
②用流動相溶解樣品。 

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