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Agilent1100液相基本操作步驟

閱讀:4491        發布時間:2008-4-23
詳細說明:
Agilent1100液相基本操作步驟 一、開機: 1、打開計算機,進入Windows NT (或Windows 2000)畫面,并運行Bootp Server程序。 2、打開 1100 LC 各模塊電源。 3、待各模塊自檢完成后,雙擊Instrument 1 Online圖標,化學工作站自動與1100LC 通訊,進入的工作站畫面如下所示。 4、從“View"菜單中選擇“MethodRun control"畫面, 單擊"View"菜單中的“Show Top Toolbar",“Show status toolbar",“System diagram","Sampling diagram",使其命令前有“√"標志,來調用所需的界面。 5、把流動相放入溶劑瓶中。 6、打開Purge閥。 7、單擊Pump圖標,出現參數設定菜單,單擊Setup pump選項,進入泵編輯畫面。 8 、設Flow:5ml/min,單擊OK。 9、單擊Pump圖標,出現參數設定菜單,單擊Pump control選項,選中On,單擊OK,則系統開始Purge,直到管線內(由溶劑瓶到泵入口)無氣泡為止,切換通道繼續Purge,直到所有要用通道無氣泡為止。 10、單擊Pump圖標,出現參數設定菜單,單擊Pump Control選項,選中Off,單擊Ok關泵, 關閉 Purge valve。 11、單擊Pump圖標,出現參數設定菜單,單擊Setup pump選項,進入Pump編輯畫面,設Flow:1.0ml/min。 12、單擊泵下面的瓶圖標,如圖所示(以二元泵為例),輸入溶劑的實際體積和瓶體積。也可輸入停泵的體積。單擊Ok。 (二)數據采集方法編輯: 1、開始編輯完整方法: ● 從“Method"菜單中選擇“Edit entire method" 項,如上圖所示選中除“Data analysis "外的三項,單擊Ok,進入下一畫面。 2、方法信息: ● 在“Method Comments"中加入方法的信息(如:方法的用途等)。 ● 單擊Ok 進入下一畫面。 3、泵參數設定:(以二元泵為例) ● 在“Flow"處輸入流量,如1ml/min,在“Solvent B"處輸入70.0,A=100-B ,也可Insert 一行"Timetable" ,編輯梯度。在“Pressure Limits Max"處輸入柱子的zui大耐高壓,以保護柱子。 ● 單擊Ok進入下一畫面。 4、自動進樣器參數設定: ● 選擇合適的進樣方式, 如圖所示,進樣體積 1.0ul ,洗瓶位置為6號。“Standard Injection"----只能輸入進樣體積,此方式無洗針功能。“Injection with Needle Wash"----可以輸入進樣體積和洗瓶位置,此方式針從樣品瓶抽完樣品后,會在洗瓶中洗針。“Use injector program"---可以點擊Edit 鍵進行進樣程序編輯。 ● 點擊Ok進入下一畫面。 5、柱溫箱參數設定: ● 在"Temperature"下面的方框內輸入所需溫度,并選中它,點擊"more>>" 鍵,如圖所示,選中"Same as left"---使柱溫箱的溫度左右一致。 ● 點擊ok進入下一畫面。 6、VWD檢測器參數設定: ● 在"Wavelength"下方的空白處輸入所需的檢測波長,如254nm, 在"Peak width Response time"下方點擊下拉式三角框,選擇合適的響應時間, 如>0.1min 2s。 ● 在Timetable 中可以“Insert"一行,輸入隨時間切換的波長,如1min ,波長=300nm。點擊ok進入下一畫面。 7、DAD檢測器參數設定: ● 檢測波長: 254nm,BW=30nm, 參比波長=350nm,BW=100nm; ● 檢測波長:一般選擇zui大吸收處的波長。樣品帶寬BW: 一般選擇zui大吸收值一半處的整個寬度。參比波長:一般選擇在靠近樣品信號的無吸收或低吸收區域。參比帶寬BW:至少要與樣品信號的帶寬相等,許多情況下用100nm作為缺省值。Peak width(Response time):其值盡可能接近要測的窄峰峰寬。Slit—狹縫窄,光譜分辨率高;寬時,噪音低。同時可以輸入采集光譜方式,步長,范圍,閾值。選中所用的燈。 ● 點擊Ok進入下一畫面。 8、 RID檢測器參數設定: ● 色譜條件: 進樣體積: 20ul 。 光學單元溫度: Off 。 極性: 正 。 峰寬響應時間 : 4s 。 ● 如圖所示: “Optical Unit Temperature"---若環境溫度控制在±2℃,設定為Off, 若環境溫度不穩定,則設定光學單元溫度為高于環境溫度5度,以防樣品在池中沉淀。“Peak width"---大多數分析設為4S,只有在高速分析下設為更短。“Automatic recycling after analysis"---在不進行分析時可以讓流動相循環,節省流動相,檢測器連續運行,可隨時投入使用。 ● ***** 點擊RID圖標,選擇RID Control :Heater 設為On,若要循環流動相,必須將“Recycling Valve"設為ON。手動purge 參比池,將其設為On,并輸入Purge 時間。 9、 FLD檢測器參數設定: 色譜條件: ● 樣品:P/N 01018-68704 用甲醇稀釋為1:10。 ● 進樣體積:5ul。 ● 柱溫箱: 30℃ 。 EX=246nm, EM=317nm ,PMT=10。 ● 響應時間=4s. 停止時間: 出峰完畢。 ● Excitation A: 激發波長:200-700nm,步長為1nm,或Zero Order。 ● Emission: 發射波長: 280-900nm, 步長為1nm,或Zero Order。 ● PMT: 大多數應用適當的設定值為10,若高濃度樣品峰被切平頭,則減少 PMT 值。 ● “Peak width":大多數應用設為4s,只有快速分析采用小的設定值。 ● Multi Ex : 多波長及光譜(激發)。 ● Multi Em:多波長及光譜(發射)。 ● 同時可以輸入范圍Range、步長step、采集光譜。 10、 在“ Run time checklist "中選中“Data acquisition",單擊Ok。 11、 單擊“Method"菜單,選中“Save method as",輸入一方法名,如“test",單擊Ok。 12、 從菜單 “View"中選中"Online signal" ,選中Windows 1,然后單擊Change 鈕,將所要繪圖的信號移到右邊的框中,點擊Ok.如同時檢測二個信號,則重復12,選中 Windows 2。 13、 從“Run control "菜單中選擇“Sample info"選項,如上圖所示,輸入操作者名稱,在“Data file "中選擇“Manual"或“Prefix"。 區別: Manual--每次做樣之前必須給出新名字,否則儀器會將上次的數據覆蓋掉。 Prefix—在Prefix 框中輸入前綴,在Counter 框中輸入計數器的起始位,儀器會自動命名,如vwd0001,vwd0002……。 14、 從Instrument 菜單選擇System on。 15、 等儀器Ready,基線平穩,從Method菜單中選擇“Run method",進樣。 (DAD, VWD色譜圖如下所示:) (三)、數據分析方法編輯: 1、 從“View"菜單中,單擊“Data analysis"進入數據分析畫面。 2、 從“File"菜單選擇“Load signal",選中您的數據文件名,如下圖所示。單擊Ok。 3、 做譜圖優化,從“Graphics"菜單中選擇“Signal options"選項,。從Ranges中選擇Auto scale及合適的顯示時間,單擊ok,或選擇"Use Ranges" 調整。反復進行,直到圖的比例合適為止。 4、積分: 1、從“Integration"中選擇 “Auto integrate",如積分結果不理想,再從菜單中選擇“Integration Events"選項,選擇合適的Slope sensitivity,Peak width,Area reject,Height reject。 2、從“Integration"菜單中選擇“Integrate"選項, 則數據被積分。 3、如積分結果不理想,則修改相應的積分參數,直到滿意為止。 4、單擊左邊“√"圖標,將積分參數存入方法。 5、打印報告: 1、從“Report"菜單中選擇“Specify report"選項,進入如上畫面。 2、單擊“Quantitative Results"框中Calculate右側的黑三角,選中Percent(面積百分比),其它選項不變。 3、單擊Ok. 4、從“Report"菜單中選擇“Print report",則報告結果將打印到屏幕上,如想輸出到打印機上,則單擊Report 底部的“Print"鈕。 四、關機: ● 關機前,用 100%的水沖洗系統20分鐘,然后用有機溶劑沖洗系統10分鐘(如ACN),然后關泵,(適于反相色譜柱)。[正相色譜柱用適當的溶劑沖洗] ● 退出化學工作站,及其它窗口,關閉計算機(用shut down關)。 ● 關掉Agilent 1100電源開關。

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