關鍵詞:Western Blotting技術服務|實驗技術服務
簡介：世界*品牌Western Blotting技術服務|實驗技術服務原裝，質量保證,*。
Western Blotting技術服務|實驗技術服務——pCzn1質粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系。
我們具備豐富的蛋白表達設計經驗及實驗操作技巧，承諾客戶不成功不收費。在獲得重組蛋白產品的同時，我們也會提供相應的原始數據和原始圖片,不需要再額外花費精力重復實驗。另一方面，我們所有的實驗數據真實可信，我們提供原始的表達菌株和克隆質粒，客戶可以依據我們的實驗報告重復我們的實驗結果。
產品品牌：   http://www.。。ｃｏｍ/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html    
測序實驗流程：
免疫蛋白質印跡(Western blotting)是根據抗原抗體的特異性結合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法。寶賽生物為您提供全套的常規免疫印記技術服務，同時本公司采用**的LICOR Odyssey雙色紅外激光成像系統和雙色熒光染料標記的二抗推出高靈敏度的紅外激光免疫印跡服務。與常規化學發光方法比較，靈敏度可達到皮克級（pg），還具有雙色成像、定量、成像清晰的優點。同時具備功能強大的軟件系統，可快速判定樣品分子量大小并進行定量分析。
主要實驗步驟如下： 
1. 蛋白質抽提
    a.實驗對象為組織樣品，取適量（250~500mg）新鮮組織樣品或正確保存的組織樣品，加1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑（或核蛋白抽提試劑），勻漿后抽提總蛋白（或核蛋白）。
    b.實驗對象為細胞樣品，每份樣品取1×106～1×107細胞，PBS清洗細胞，去PBS加0.1ml~1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑（或核蛋白抽提試劑）抽提總蛋白（或核蛋白）。 
2. 蛋白質定量
    按KCTMBCA蛋白質定量試劑盒操作說明操作，測定樣品濃度。
3. 變性聚丙烯酰胺不連續凝膠電泳(SDS-PAGE)  
    將準備好的樣品液和生物素標記的蛋白質分子量標準分別上樣，標準加進*個孔中，電泳分離蛋白。
4. 蛋白質轉移到硝酸纖維膜或PVDF膜
    按Bio-Rad蛋白轉移裝置說明組裝濾紙凝膠纖維素夾層，30mA恒流條件下，4°C轉移。
5. 膜的封閉和抗體孵育
    a．膜在5％BSA溶液中室溫孵育1小時以封閉膜上的非特異結合。
    b.封閉過的膜加入一級抗體室溫孵育1.5小時，抗原抗體結合。 
    c.加入HRP標記的二級抗體以結合一級抗體及HRP標記的抗生物素抗體以結合分子量標準，室溫孵育膜1小時。加入HRP標記的GAPDH抗體可同時檢測GAPDH含量。。
6. 結果檢測
    化學發光法檢測，膜與化學發光底物孵育，經X膠片曝光顯影。圖片掃描保存為電腦文件，并用ImageJ分析軟件將圖片上每個特異條帶灰度值的數字化。
7. 數據分析
    目的蛋白的灰度值除以內參GAPDF的灰度值以校正誤差，所得結果代表某樣品的目的蛋白相對含量。
8. 提供實驗報告
包括詳細的實驗方法及免疫印跡實驗結果的相關圖表.