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用于檢測抗體的ELISA

時(shí)間：2011/10/13閱讀：863

乾思生物編輯整理：

間接ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒）本法主要用于檢測抗體。以鴨病毒性肝炎（DVH）抗體的ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒）為例，間接ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒）的操作程序如下。

　　（1）材料

　　① 包被液、洗滌液、保溫液、底物液、終止液；

　　② DVH包被抗原、酶標(biāo)抗抗體、陰性及陽性DVH參考血清；待檢鴨血清；

　?、?ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒）檢測儀、加樣器、聚苯乙烯微量板。

　?。?）方法步驟

　?、?加抗原包被 → 4℃過夜，洗滌三次、拋干

　　② 加待檢血清 → 37℃ 2小時(shí)，洗滌三次、拋干

　?、?加酶標(biāo)抗體 → 37℃ 2小時(shí)，洗滌三次、拋干

　?、?加底物液 → 37℃ 30分鐘，加終止液

　　⑤ 用ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒）檢測儀測定OD值，并計(jì)算出P/N比值。

　?。?）結(jié)果判定已知陽性血清與已知陰性血清的比值（P/N）≥2.1，而且已知陽性血清的OD值≥0.4；在上述條件成立的情況下，如果待檢血清與已知陰性血清的比值（P/N）≥2.1，而且待檢血清的OD值≥0.4，則判為陽性，否則判為陰性。

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