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刺五加浸膏藥典液相色譜儀檢測方法-HPLC

時間:2013/10/18閱讀:3763
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本品為五加科植物刺五加Acanthopanax senticosus (Rupr. et Maxim.) Harms的干燥根及根莖或莖用水或乙醇提取加工制成的浸膏。

【制法】取刺五加1000g,粉碎成粗粉,加水煎煮兩次,每次3小時,合并煎液,濾過,濾液濃縮成浸膏50g(水浸膏),即得;或取刺五加1000g,粉碎成粗粉,加75%乙醇,回流提取12小時,濾過,濾液回收乙醇至無醇味,濃縮成浸膏40g(醇浸膏),即得。

【性狀】本品為黑褐色的稠膏狀物;氣香,味微苦、澀。

【鑒別】取本品0.5g,加70%乙醇20ml,超聲處理30分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加甲醇1m1使溶解,作為供試品溶液。另取刺五加對照藥材2.5g,加甲醇20ml,加熱回流1小時,濾過,濾液蒸干,殘渣加甲醇1rnl使溶解,作為對照藥材溶液。再取異嗪皮啶對照品、紫丁香苷對照品,分別加甲醇制成每1ml含異嗪皮啶0.5mg、紫丁香苷lmg的溶液,作為對照品溶液。照薄層色譜法(附錄VI B)試驗,吸取上述供試品溶液與對照藥材溶液各10μl、兩種對照品溶液各2μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,以三氯甲烷-甲醇-水(6:2:1)的下層溶液為展開劑,展開,取出,晾干,置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應的位置上,顯相同顏色的熒光主斑點;在與異嗪皮啶對照品色譜相應的位置上,顯相同顏色的熒光斑點;噴以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰,在與對照藥材色譜相應的位置上,顯相同顏色的主斑點;在與紫丁香苷對照品色譜相應的位置上,顯相同的藍紫色斑點。

【檢查】 水分 水浸膏不得過30.0%;醇浸膏不得過20.0%(附錄Ⅸ H*法)。

總灰分 不得過6.0%(附錄Ⅸ K)。

其他 應符合流浸膏與浸膏項下有關的各項規定(附錄I O)。

【浸出物】取本品水浸膏2.5g,精密稱定,置100ml具塞錐形瓶中,精密加水25ml使溶散(必要時以玻璃棒攪拌使溶散),再精密加水25ml沖洗瓶壁及玻璃棒,密塞,稱定重量,超聲處理30分鐘,放冷,再稱定重量,用水補足減失的重量,搖勻,濾過,精密量取續濾液25ml,置已干燥至恒重的蒸發皿中,在水浴上蒸干后,于105℃干燥3小時,置干燥器中冷卻30分鐘,迅速精密稱定重量。以干燥品計算供試品中水溶性浸出物的含量,不得少于90.0%。或取本品醇浸膏,照醇溶性浸出物測定法項下的熱浸法(附錄X A)測定,用甲醇作溶劑,不得少于60.0%。

【含量測定】 照液相色譜法(附錄VI D)測定。

色譜條件與系統適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以乙腈為流動相A,以0.1%磷酸溶液為流動相B,按下表中的規定進行梯度洗脫;檢測波長為220nm;柱溫30℃。理論板數按紫丁香苷峰計算應不低于10 000;異嗪皮啶峰與相鄰雜質峰的分離度應不小于1.5。

時間(分鐘)

流動相A(%)

流動相B(%)

0~20

20~30

30~40

40~50

10→20

20→25

40

10

90→80

80→75

60

90

對照品溶液的制備 取紫丁香苷對照品、刺五加苷E對照品、異嗪皮啶對照品適量,精密稱定,加甲醇(刺五加苷E對照品先加50%甲醇溶解)制成每1ml含紫丁香苷、刺五加苷E各40μg、異嗪皮啶10μg的混合溶液,即得。

供試品溶液的制備 取本品約0.2g,精密稱定,置小燒杯中,用50%甲醇20ml,分次溶解,轉移至25ml量瓶中,超聲處理(功率250W,頻率50kHz)10分鐘,取出,放冷,加50%甲醇至刻度,搖勻,濾過,取續濾液,即得。

測定法 分別精密吸取對照品溶液10μl與供試品溶液10~20μl,注入液相色譜儀,測定,即得。

本品按干燥品計算,水浸膏含紫丁香苷(C17H24O9)不得少于0.60%、刺五加苷E(C34H46O18)不得少于0.30%、異嗪皮啶(C11H10O5)不得少于0.10%;醇浸膏含紫丁香苷(C17H24O9)不得少于0.50%、刺五加苷E(C34H46O18)不得少于0.30%、異嗪皮啶(C11H10O5)不得少于0.12%。

【貯藏】密封。

【制劑】刺五加片

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