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動物源性食品中喹諾酮類藥物殘留LC-MS/MS分析方法

閱讀:780      發布時間:2023-3-30
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背景:喹諾酮類(Quinolones, QNs)是人工合成的一類抗菌藥物,因其具有抗菌譜廣、高效、低毒、組織穿透力強、價格低廉等特點,已成為食品動物飼養和水產養殖中最重要的抗感染藥物之一,但由于細菌對喹諾酮類藥物耐藥性的產生和某些喹諾酮類藥物的潛在致癌作用,其殘留問題已引起廣泛關注。2003 年我國的鰻魚產品就曾因氟喹諾酮類藥物殘留問題出口日本受阻。目前,包括我國在內的許多國家和地區都對喹諾酮類藥物的使用范圍和最大殘留做出規定。歐盟規定動物肌肉等組織中恩諾沙星等的 MRLs 為 0.01 ~ 1.9 mg/kg;美國禁止在水產養殖業中使用 QNs;日本對進口生鰻魚及其制品的環丙沙星等殘留控制在檢測限的 0.05 mg/kg。中華人民共和國農業部公告第 2292 號,自2016 年 12 月 31 日起,停止經營、使用用于食品動物的洛美沙星、培氟沙星、氧氟沙星、諾氟沙星 4 種原料藥的各種鹽、酯及其各種制劑。本文根據《GB/T 20366-2006 動物源產品中喹諾酮類殘留量的測定 液相色譜 - 串聯質譜法》,采用PerkinElmer QSightTM LCMSMS 建立動物源食品中喹諾酮類藥物殘留的解決方案。


樣品前處理方法提取稱取 5.0 g 試樣,置于 50 mL 聚四氟乙烯離心管中,加入 20 mL 甲酸 - 乙腈溶液(1:49),均質 1 min,以 4000 r/min 離心 5 min。上清液移入另一個 50 mL聚四氟乙烯離心管中。將離心殘渣用 20mL 甲酸 - 乙腈溶液再提取一次,合并上清液。凈化將上清液轉移至 125 mL 分液漏斗中,加入 25 mL乙腈飽和的正己烷,振搖 2 min,將下層溶液轉移至100 mL 棕色雞心瓶中,于 40 ℃水浴中旋蒸至近干,氮吹至干。準確加入1.0 mL甲酸-乙腈溶液溶解殘渣,渦流混勻后,過濾至樣品瓶中,供 LC-MS/MS 測定。


LC-MS/MS 方法液相色譜參數色譜柱:Brownlee SPP C18,100 mm*2.1 mm,2.7μm (貨號:N9308404)柱溫:35 ℃流動相:A:乙腈,B:水(含 0.1 % 甲酸,2.0 mM乙酸銨)流速:0.4 mL/min運行時間:10 min梯度洗脫:洗脫程序見表 1:

1.png

譜參數以下參數以 PerkinElmer QSight 200 系列為例,喹諾酮類化合物質譜參數見表 2。

2.png

離子源質譜參數:離子源模式:電噴霧離子源,正離子模式(ESI+)反吹氣:75霧化氣:220離子源溫度:450 ℃離子源噴霧電壓:5000 V

結論本方法滿足對 GB/T 20366-2006 動物源產品中喹諾酮類殘留量的檢測要求(標準里的量為 1.0 μg/kg),適用于喹諾酮及其類似物的日常檢測。PerkinElmer QSight 210TM 系統滿足動物源產品中喹諾酮類殘留量的日常檢測工作。該質譜系統離子源具有自清潔功能以及質譜接口 HSID 熱源去溶劑技術,提高儀器抗污染能力,從而獲得更低的噪音,更低的檢測限,從容應對復雜基質的食品安全檢測


參考文獻1. GB/T 20366-2006 動物源產品中喹諾酮類殘留量的測定 液相色譜 - 串聯質譜

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