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上海棱光技術(shù)有限公司

可見(jiàn)分光光度計(jì)的原理和使用方法

時(shí)間:2018-1-22 閱讀:3257
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  可見(jiàn)分光光度計(jì)原理
  光是一種電磁波,具有一定的波長(zhǎng)和頻率。可見(jiàn)光的波長(zhǎng)范圍在400~760nm,紫外光為200~400nm,紅外光為760~500000nm??梢?jiàn)光因波長(zhǎng)不同呈現(xiàn)不同顏色,這些波長(zhǎng)在一定范圍內(nèi)呈現(xiàn)不同顏色的光稱單色光。太陽(yáng)或鎢絲等發(fā)出的白光是復(fù)合光,是各種單色光的混合光。利用棱鏡可將白光分成按波長(zhǎng)順序排列的各種單色光,即紅、橙、黃、綠、青、藍(lán)、紫等,這就是光譜。有色物質(zhì)溶液可選擇性地吸收一部分可見(jiàn)光的能量而呈現(xiàn)不同顏色,而某些無(wú)色物質(zhì)能特征性地選擇紫外光或紅外光的能量。物質(zhì)吸收由光源發(fā)出的某些波長(zhǎng)的光可形成吸收光譜,由于物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)不同,對(duì)光的吸收能力不同,可見(jiàn)分光光度計(jì)因此每種物質(zhì)都有特定的吸收光譜,而且在一定條件下其吸收程度與該物質(zhì)的濃度成正比,分光光度法就是利用物質(zhì)的這種吸收特征對(duì)不同物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析的方法。
  在比色分析中,有色物質(zhì)溶液顏色的深度決定于入射光的強(qiáng)度、有色物質(zhì)溶液的濃度及液層的厚度。當(dāng)一束單色光照射溶液時(shí),入射光強(qiáng)度愈強(qiáng),溶液濃度愈大,液層厚度愈厚,溶液對(duì)光的吸收愈多,它們之間的關(guān)系,符合物質(zhì)對(duì)光吸收的定量定律,即Lambert-Bear 定律。這就是分光光度法用于物質(zhì)定量分析的理論依據(jù)。
  可見(jiàn)分光光度計(jì)注意事項(xiàng)
  1、該儀器應(yīng)放在干燥的房間內(nèi),使用時(shí)放置在堅(jiān)固平穩(wěn)的工作臺(tái)上,室內(nèi)照明不宜太強(qiáng)。熱天時(shí)不能用電扇直接向儀器吹風(fēng),防止燈泡燈絲發(fā)亮不穩(wěn)定。
  2、使用本儀器前,使用者應(yīng)該首先了解本儀器的結(jié)構(gòu)和工作原理,以及各個(gè)操縱旋鈕之功能。在未按通電源之前,應(yīng)該對(duì)儀器的安全性能進(jìn)行檢查,電源接線應(yīng)牢固,通電也要良好,各個(gè)調(diào)節(jié)旋鈕的起始位置應(yīng)該正確,然后再按通電源開關(guān)。
  可見(jiàn)分光光度計(jì)使用方法
  721可見(jiàn)分光光度計(jì)其波長(zhǎng)范圍360~800nm,色散元件為三角棱形.
  1.檢查儀器各調(diào)節(jié)鈕的起始位置是否正確,接通電源開關(guān),打開樣品室暗箱蓋,使電表指針處于“0”位,預(yù)熱20min后,再選擇須用的單色光波長(zhǎng)和相應(yīng)的放大靈敏度檔,用調(diào)“0”電位器調(diào)整電表為T=0%。
  2.蓋上樣品室蓋使光電管受光,推動(dòng)試樣架拉手,可見(jiàn)分光光度計(jì)使參比溶液池(溶液裝入4/5高度,置*格)置于光路上,調(diào)節(jié)100%透射比調(diào)節(jié)器,使電表指針指T=100%。
  3.重復(fù)進(jìn)行打開樣品室蓋,調(diào)0,蓋上樣品室蓋,調(diào)透射比為100%的操作至儀器穩(wěn)定。
  4.蓋上樣品室蓋,推動(dòng)試樣架拉手,使樣品溶液池置于光路上,讀出吸光度值。讀數(shù)后應(yīng)立即打開樣品室蓋。
  5.測(cè)量完畢,取出比色皿,洗凈后倒置于濾紙上晾干。各旋鈕置于原來(lái)位置,電源開關(guān)置于“關(guān)”,拔下電源插頭。
  6.可見(jiàn)分光光度計(jì)放大器各檔的靈敏度為:“l” ×1倍;“2”×10倍;“3”×20倍,靈敏度依次增大。由于單色光波長(zhǎng)不同時(shí),光能量不同,需選不同的靈敏度檔。選擇原則是在能使參比溶液調(diào)到T= 100%處時(shí),盡量使用靈敏度較低的檔,以提高儀器的穩(wěn)定性。改變靈敏度檔后,應(yīng)重新調(diào)“0”和“100”。

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