Acclaim Organic Acid—脫氫乙酸峰型拖尾“終結者"

胡金勝

食品安全國家標準修訂

2021年3月26日，國家衛生健康委員會食品安全國家標準審評委員會秘書處發函，對組織起草的《食品添加劑使用標準》等12項食品安全國家標準（征求意見稿）公開征求意見。備受關注的GB 2760時隔多年再次修訂，變更的內容涉及到多個常用的食品添加劑，其中防腐劑“脫氫乙酸及其鈉鹽" 使用規定的修改引發了熱議。

左右滑動查看GB 2760中脫氫乙酸

及其鈉鹽修訂細節

脫氫乙酸及其鈉鹽作為一種廣譜食品防腐劑，毒性較低，對霉菌和酵母菌的抑制能力強，按標準規定的范圍和使用量使用是安全可靠的。然而通過匯總近些年來全國各地食品安全監督抽檢結果，我們不難發現脫氫乙酸及其鈉鹽超*、超范圍使用的情況屢有發生。由于脫氫乙酸及其鈉鹽能被人體*吸收，并能抑制人體內多種氧化酶，長期過量攝入脫氫乙酸及其鈉鹽會危害人體健康。

隨著GB 2760征求意見稿的發布，針對食品添加劑脫氫乙酸及其鈉鹽，收窄了使用范圍，降低了最大使用量，釋放了監管部門將進一步加強監管的信號。由于政策信息傳遞的延遲及生產工藝革新的滯后，部分食品企業可能會面臨因脫氫乙酸及其鈉鹽超*、超范圍使用而被監管部門處罰的風險。

目前，食品檢測實驗室參照GB 5009.121-2016開展脫氫乙酸的測定也會遇到一系列的難題，其中最突出的問題就是脫氫乙酸峰型拖尾，影響定性和定量結果的準確性。脫氫乙酸屬于非羧基酸類，分子結構存在烯醇互變，導致在普通C18 上峰型容易出現拖尾。相關文獻顯示，通過調節緩沖鹽pH（調酸或調堿）和有機相比例可以在一定程度上抑制脫氫乙酸的拖尾，但是在食品安全監督抽查中對于實驗室方法的偏離及變更有著較為嚴格的審核流程，這也是實驗室體系管理難以回避的問題。

基于此，賽默飛實驗室篩選了一款特色色譜柱—Acclaim Organic Acid，在不變更標準色譜條件的前提下，開展了一系列的驗證工作，完美解決了脫氫乙酸峰型拖尾的問題，并且在實際樣品分析過程中有著出色的表現。

Acclaim Organic Acid有機酸分析專用柱，極性嵌入，專利封端技術，可耐受 100% 水相，PEEK 柱管，可有效消除硅膠表面殘余硅羥基及金屬柱管內壁與有機酸分子次級作用導致的拖尾。

實驗譜圖及數據

色譜條件

液相色譜儀：Vanquish™ Core HPLC 液相色譜系統

色譜柱：Acclaim Organic Acid, 5 μm, 4.0×250 mm    (P/N: 062902)

柱溫：30 ℃；

進樣量：5 µL；

流動相：A為20 mM 乙酸銨溶液，B為甲醇

洗脫程序：A:B=90:10，等度洗脫

流速：0.8 mL/min

檢測波長：293 nm

采樣頻率：5 Hz

采集時間：15 min

分離譜圖

脫氫乙酸標準品溶液5.00 μg/mL，保留時間為7.107 min，不對稱因子為1.04，理論塔板數為13830。脫氫乙酸在 Acclaim Organic Acid 色譜柱上獲得了出色的峰型和優異的靈敏度。

圖1. 脫氫乙酸標準品溶液色譜圖（5.00 μg/mL） 

脫氫乙酸標準工作液線性范圍為0.50-50.0 μg/mL，線性方程y=0.6283x-0.0141，線性相關系數r2=0.99990，線性關系良好。

圖2. 脫氫乙酸線性方程圖及標準曲線點疊加色譜圖（0.50-50.0 μg/mL）

以脫氫乙酸峰高為 S，選取 4-6 min 基質噪音的平均值為 N，采用 Chromeleo 數據處理軟件計算信噪比 S/N，脫氫乙酸線性低點 0.50 μg/mL信噪比S/N為181.8。實驗室可根據實際情況設置合適的線性最低點，以滿足方法檢出限的要求。

圖3. 脫氫乙酸線性低點 0.50 μg/mL 色譜圖及信噪比

脫氫乙酸標準品溶液 1.00 μg/mL 重復進樣，保留時間RSD為0.04%，峰面積RSD為0.28%，不對稱因子RSD為0.34%，重現性良好。

圖4. 脫氫乙酸標準品溶液 1.00 μg/mL 6次重復進樣疊加譜圖

在實際樣品分析中，面對各種復雜基質的干擾，Acclaim Organic Acid 表現出了非常出色性能。以下譜圖分別展示了Acclaim Organic Acid 應用于雞蛋掛面、豬肉脯、肉松面包、法式小面包及芒果汁中脫氫乙酸的測定。樣品前處理方法采用標準推薦的直提法，其中芒果汁樣品基質復雜，對流動相比例和柱溫進行了適當調整。

圖5. 雞蛋掛面中脫氫乙酸的測定

圖6. 豬肉脯中脫氫乙酸的測定

圖7. 肉松面包中脫氫乙酸的測定

圖8. 法式小面包中脫氫乙酸的測定

圖9. 芒果汁中脫氫乙酸的測定

本試驗基于Vanquish™ Core HPLC液相色譜系統，采用Acclaim Organic Acid有機酸分析專用柱，對多種食品基質中脫氫乙酸的測定開展了驗證。實驗結果表明，Acclaim Organic Acid能夠完美解決脫氫乙酸峰型拖尾的問題，有效排除各種復雜樣品基質的干擾，為食品實驗室準確定性和定量分析脫氫乙酸，提供了一個高效便捷的方法。

那么，有請我們的主角閃亮登場……

此處應有掌