香草醛是食品、飲料等工業(yè)應(yīng)用zui廣泛的香料之一，還可作為保鮮劑及醫(yī)藥等工業(yè)的原材料。香草醛目前主要由化學(xué)方法制備，但化學(xué)合成制得的香草醛不屬于天然香料。生物轉(zhuǎn)化法生產(chǎn)香草醛多采用阿魏酸作為前體物質(zhì)，轉(zhuǎn)化過程中會產(chǎn)生香草酸等中間產(chǎn)物。
    液相色譜儀廠家相關(guān)研究曾采用過薄層色譜法測定阿魏酸、香草酸和香草醛，但是此法定量欠準確，層析時板與板之間重現(xiàn)性較差。因此，研究了能同時測定發(fā)酵或生物轉(zhuǎn)化液中阿魏酸、香草酸和香草醛的反相液相色譜法，該方法的重現(xiàn)性好，準確、可靠，可方便地檢測發(fā)酵進程。
    實驗儀器：液相色譜儀；微量進樣器，微膜過濾器。
    色譜條件：色譜柱 (250mm×4mmi.d.，5μm)，流動相為：A=0.01%冰醋酸水溶液，B=甲醇；時間程序：開始時20%B，保持4min，到24min時增加至40%，到27min時增加至100%并保持2min，到30min時又降至20%，并以這種比例使柱子平衡至少5min；流速為1mL/min。檢測波長：280nm檢測；進樣量：25μL；柱溫：室溫。
    測定方法
    1精密稱取阿魏酸、香草酸、香草醛標樣各0.5g，用甲醇定容至50mL，得到10g/L的標準貯備液，再由貯備液配制一系列不同濃度的3種標樣的混合溶液，用液相色譜儀進行測定，得出結(jié)果繪制標準曲線。
    2將發(fā)酵液或生物轉(zhuǎn)化液先用濾紙過濾，再加入適量的無水乙醇，離心以除去蛋白質(zhì)等大分子雜質(zhì)，在除去雜質(zhì)的樣品中加入20%的甲醇后，再將其pH值調(diào)至5，用0.22μm微濾膜過濾得濾液。
    3任意選取3個樣品，按上述實驗方法處理后進樣測定。