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天津市蘭博實驗儀器設(shè)備有限公司

關(guān)于液相色譜儀的梯度洗脫的介紹

時間:2015-10-24 閱讀:755
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    液相色譜儀廠家生產(chǎn)的液相色譜儀有等強度和梯度洗脫兩種方式。等度洗脫是在同一分析周期內(nèi)流動相組成保持恒定,適合于組分?jǐn)?shù)目較少,性質(zhì)差別不大的樣品。梯度洗脫是在一個周期內(nèi)程序控制流動相的組成,如溶劑的極性、離子強度和PH值等,用于分析組分?jǐn)?shù)目多、性質(zhì)差異罰大的復(fù)雜樣品。采用梯度洗脫可以縮短分析時間,提高分離度,改善峰形,提高檢測靈敏度,但是常常引起基線漂移和降低重現(xiàn)性。 梯度洗脫有兩種方式:低壓梯度(外梯度)和高壓梯度(內(nèi)梯度)。
 

    兩種溶劑組成的梯度洗脫可按任意程度混合,即有多種洗脫曲線:線性梯度、凹形梯度、凸形梯度和階梯形梯度。線性梯度zui常用,尤其適合于在反相柱上進(jìn)行梯度洗脫。 在進(jìn)行梯度洗脫時,由于多種溶劑混合,而且組成不斷變化,因此帶來一些特殊問題,必須充分重視:
 

    ①要注意溶劑的互溶性,不相混溶的溶劑不能用作梯度洗脫的流動相,有些溶劑在一定比例內(nèi)混溶,超出范圍就不互溶,使用時更要引起注意。當(dāng)有機溶劑和緩沖液混合時,還可能析出鹽的晶體,尤其使用磷酸鹽時需特別小心。 
 

    ②梯度洗脫所用的溶劑純度要求更高,以保證良好的重現(xiàn)性。進(jìn)行樣品分析前必須進(jìn)行空白梯度洗脫,以辨認(rèn)溶劑雜質(zhì)峰,因為弱溶劑中的雜質(zhì)富集在色譜柱頭后會被強溶劑洗脫下來。用于梯度洗脫的溶劑需*脫氣,以防止混合時產(chǎn)生氣泡。 
 

    ③混合溶劑的粘度常隨組成而變化,因而在梯度洗脫時常出現(xiàn)壓力的變化。例如甲醇和水粘主度都較小,當(dāng)二者以相近比例混合時粘度增大很多,此時的柱壓大約是甲醇或水流動相時的兩倍。因此要注意防止梯度洗脫過程中壓力超過輸液泵或色譜柱能承受的zui大壓力。

    ④每次梯度洗脫之后必須對色譜柱進(jìn)行再生處理,使其恢復(fù)到初始流動相流經(jīng)色譜柱,使固定相與初始流動相達(dá)到*平衡。

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