熒光檢測器是液相色譜系統的“眼睛”，測量離開柱的樣品的濃度或質量。光電檢測器測量柱流出物的光吸收、熒光和折光率的變化。電化學和電導檢測器溶液的變化。其靈敏度在目前常用的HPLC檢測器中高，在HPLC中應用較多。能發射熒光的物質或能用柱前或柱后衍生法轉變成熒光衍生物的物質均可以使用熒光檢測器進行分析。
激發波長和發射波長是熒光檢測的必要參數。選擇合適的激發波長和發射波長，對檢測的靈敏度和選擇性都很重要，尤其是可以較大程度地提高檢測靈敏度。
熒光屬于光致發光，需選擇合適的激發光波長(Ex)以利于檢測。激發波長可通過熒光化合物的激發光譜來確定。激發光譜的具體檢測辦法是通過掃描激發單色器，使不同波長的入射光激發熒光化合物，產生的熒光通過固定波長的發射單色器，由光檢測元件檢測。zui終得到熒光強度對激發波長的關系曲線就是激發光譜。在激發光譜曲線的zui大波長處，處于激發態的分子數目zui多，即所吸收的光能量也zui多，能產生zui強的熒光。當考慮靈敏度時，測定應選擇zui大激發波長。
一般所說的熒光光譜，實際上僅指熒光發射光譜。它是在激發單色器波長固定時，發射單色器進行波長掃描所得的熒光強度隨熒光波長(即發射波長，Em)變化的曲線。熒光光譜可供鑒別熒光物質，并作為熒光測定時選擇合適的測定波長的依據。
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