諾博萊德 真菌蛋白提取試劑盒

NobleRyder P5085 真菌蛋白提取試劑盒（蛋白組實驗、質譜適用）

產品貨號：P5085

產品名稱：真菌蛋白提取試劑盒（蛋白組實驗、質譜適用）

產品規格：50T/100T

真菌蛋白提取試劑盒-常備現貨

產品簡介：

中文名稱：真菌蛋白提取試劑盒（蛋白組實驗、質譜適用）

規格：100T ; 50T

儲存條件：2-8℃，1 year

具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準

NobleRyder P5085 真菌蛋白提取試劑盒（蛋白組實驗、質譜適用）

真菌蛋白提取試劑盒（蛋白質組學實驗適用）適用于從各種絲狀真菌中提取總蛋白。優化的裂解液配方可以充分釋放各種有隔膜菌絲和無隔膜菌絲蛋白以及各種菌絲bian態體蛋白，提取過程簡單方便，可在1小時內完成。本試劑盒含有的du特配方能夠有效溶解細胞膜組份，包括細胞質膜、核膜和各種細胞器膜。本試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對蛋白的降解，為提取高純度的蛋白提供了保證。本試劑盒的蛋白提取組份中不含有不可透析除去的去垢劑組份，不含SDS、TritonX-100、chaps等可能影響質譜實驗的組份，最后得到的蛋白質樣品經過透析或者脫鹽處理后將不含有去垢劑、高濃度鹽等影響，基本可以滿足下游任意的蛋白質組學相關實驗研究。本產品的蛋白酶抑制劑混合物中不含AEBSF，可以避免由于AEBSF導致的質譜峰漂移，因此使用本產品提取的蛋白樣品可以用于質譜(MassSpectrometry,MS)檢測和分析，蛋白質組學(proteomics)等相關研究。

適用樣本：真菌

注：

1. 蛋白提取液A2、蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。

2. 蛋白提取液A2避免反復凍融。

3. 蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時是固體狀態，從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴，變成液體狀態后離心至管底部再開蓋。

4. 試劑拆封后請盡快使用完！

產品簡介：

真菌蛋白提取試劑盒（蛋白質組學實驗適用）適用于從各種絲狀真菌中提取總蛋白。優化的裂解液配方可以充分釋放各種有隔膜菌絲和無隔膜菌絲蛋白以及各種菌絲bian態體蛋白，提取過程簡單方便，可在 1 小時內完成。

本試劑盒含有的du特配方能夠有效溶解細胞膜組份。本試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對蛋白的降解，為提取高純度的蛋白提供了保證。

本試劑盒的蛋白提取組份中不含有不可透析除去的去垢劑組份，不含 SDS、Triton X-100、chaps 等可能影響質譜實驗的組份，最后得到的蛋白質樣品經過透析或者脫鹽處理后將不含有去垢劑、高濃度鹽等成分，基本可以滿足下游任意的蛋白質組學相關實驗研究。

本產品的蛋白酶抑制劑混合物中不含 AEBSF，可以避免由于 AEBSF 導致的質譜峰漂移，因此使用本產品提取的蛋白樣品可以用于質譜(Mass Spectrometry, MS)檢測和分析，蛋白質組學(proteomics)等相關研究。

需要提取蕈類真菌等大型真菌蛋白質可以選用貨號為 EX1710 的試劑盒。

本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構象的活性蛋白。

本試劑盒中不含有 EDTA，與金屬螯和層析等下游應用兼容。

本試劑盒提取的蛋白也可用于 Western Blotting、蛋白質電泳、免疫沉淀、ELISA、轉錄活性分析、Gel shift 凝膠阻滯實驗、酶活性測定等下游蛋白研究實驗。

自備試劑和儀器：

離心機、振蕩器、勻漿器、渦旋混勻器、移液器、冰箱、冰盒，PBS 緩沖液、蛋白定量試劑盒，離心管、吸頭、一次性手套

1. 使用方便，從細胞，組織中提取蛋白不需經過研磨、反復凍融、超聲破碎等前處理。

2. 提取過程簡單方便，將蛋白提取的時間縮短至 30 分鐘-1 小時。

3. 含蛋白穩定劑，提取的蛋白穩定。

4. 紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。

5. 總蛋白提取液含多種有效成分，可以充分釋放胞漿蛋白、核蛋白和膜蛋白，又可結合釋出的蛋白防止沉淀。

6. 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優化。蛋白酶抑制劑混合物包含 5種獨立的蛋白酶抑制劑 Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64，每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括si氨酸蛋白酶、半guang氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

使用方法：

一、使用注意事項：

1. 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內壁上的液體甩至管底，避免開蓋時液體灑落。

2. 實驗過程中的所有試劑須預冷；所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。

3. 蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。

4. 可以根據自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。

5. 離心機轉速有相對離心力（RCF，×g）和每分鐘轉速（RPM）兩種表示方式，有些離心機設置有 RPM 和×g 顯示切換，但部分離心機沒有自動切換功能。需要用下面的公式進行換算：g=r×1.118×10^-5×rpm²（r 為有效離心半徑，即從離心機軸心到離心收集管底部中心位置的長度，單位為厘米) 例如: 轉速為 3000rpm，有效離心半徑為 10 cm，則相對離心力（RCF，×g）為=10×1.118×10^-5×3000²=1006.2（×g）。

二、真菌蛋白提?。?/span>

1. 提取液制備：

將試劑 A1 和試劑 A2 混合，配成蛋白提取液 A，充分混勻備用。

每 500ul 真菌蛋白提取液 A 中加入 2ul 蛋白酶抑制劑混合物，混勻后置冰上備用。

【注】：

1) 蛋白提取液 A 置 4℃保存，長期不用的可以分裝后-20℃保存。

2) 根據需要處理的樣品數量準備蛋白提取液，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。

3) 加過蛋白酶抑制劑的提取液一周內未使用完，再次使用前需要再次加入蛋白酶抑制劑。

2. 取培養絲狀真菌，在 4℃，5000×g 條件下離心 5-10 分鐘，小心吸取培養基，盡可能吸干，收集菌體。

3. 用冷 PBS 洗滌細胞兩次，每次洗滌后盡可能吸干上清。

4. 將菌體置于研缽中用液氮研磨至粉末。

【注】：

1) 若無液氮研磨條件，可直接用蛋白提取液研磨。

5. 每 100mg 菌體中加入 300ul-500ul 蛋白提取液，混勻后，在 2-8℃條件下振蕩 20-30 分鐘。

【注】：

1) 使用振蕩器/搖床的較低轉速，提取液能輕微晃動即可。

2) 沒有振蕩條件也可以不振蕩，稍微延長提取液的處理時間，中間每隔幾分鐘用移液器吹打混勻即可。

6. 在 4℃，12000×g 條件下離心 10 分鐘。

7. 將上清吸入另一預冷的干凈離心管，即可得到真菌總蛋白。

8. 將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存備用或用于下游實驗。

【注】：

1) 建議用 BCA 法進行蛋白定量。

2) 蛋白樣品-80℃存放一年沒有問題。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被細菌污染。

9. 將蛋白樣品透析處理或者脫鹽柱脫鹽處理后用于下游實驗。

【注】：

1) 蛋白樣品中含有鹽，需要脫鹽處理后用于雙向電泳。

2) 經透析或脫鹽離心柱處理的蛋白樣品不含有去垢劑和高濃度鹽。

注意事項：

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗，以優化實驗條件，取得優良實驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹di清除殘留清潔劑。

6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規定程序處理。

7. 本試劑盒僅供科學研究使用，不可用于診斷或治療。

8. 避免皮膚或粘膜與試劑接觸；如果試劑不小心接觸皮膚或眼睛，應立即用水沖洗。

真菌蛋白提取試劑盒-常備現貨

產品訂購信息：

P5085  真菌蛋白提取試劑盒（蛋白組實驗、質譜適用）  50T/100T