Karpas-299+LUC 人間變性大細胞淋巴瘤細胞

細胞特性

種屬: 人源（Homo sapiens）

組織來源: 外周血（Peripheral blood）

疾病: 淋巴瘤（Lymphoma）

年齡: 25歲（25 years）

性別: 男（Male）

細胞類型: T細胞淋巴瘤（T cell lymphoma）

生長特性: 懸浮生長（Suspension）

含量：>1x10^6  細胞數

規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

用途：僅供科研使用。

運輸和保存

干冰運輸及復蘇好存活細胞

（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇，若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系。

（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

細胞接收后的處理

1）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態的依據。

3）貼壁細胞：細胞在37℃培養箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養瓶中灌液培養基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養瓶中）,加入新配制的專用培養基6-8mL，放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

4）備注：運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的專用培養基來培養細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養瓶1：2傳代 。               

一．培養基及培養凍存條件準備：

1）1640培養基+20%FBS+1%P/S雙抗

2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。

二． 細胞處理：

1） 凍存細胞的復蘇：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL專用培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，專用培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml專用培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來終止消化。 

3. 輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的專用培養基以保持細胞的生長活力，后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。

上海語純生物科技有限公司，是由具有優良生命科學、生物技術背景人員共同創辦的技術企業。公司專注于原代細胞、腫瘤細胞及細胞培養相關試劑產品，為高校、食品、醫藥、生物研究等領域提供相關技術支持和服務。

公司自成立以來通過不斷地科技創新，產品研發，已為客戶提供定制化細胞產品以及完整的細胞培養解決方案，通過積極地探索、研發、深化和豐富產品，目前基礎培養基產品種類多達200多種，細胞系300多種，原代細胞接近600種。我們始終以“發展科學技術，關愛公眾生命健康"為動力，通過技術創新，廣泛吸納高科技人才，不斷完善產品體系、豐富產品鏈，積極拓展市場，擴充應用領域，，建立了具有市場競爭力的“語純"品牌。

注意事項

1、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套及口罩操作；

2、為保持本產品的優良使用效果，請務必按照建議的儲存條件進行保存；

3、本產品僅供科學研究或進一步生產使用，不可用于臨床診斷或治療。

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