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服務說明
研究蛋白質(zhì)首要的步驟是將目的蛋白從復雜的大分子混合物中分離純化出來,得到高純度具有生物學活性的目的物。因此,高效的純化技術和手段是蛋白質(zhì)研究的重要基礎和關鍵之一。
蛋白質(zhì)是包括人類在內(nèi)的各種生物有機體的重要組成成分,是生命的物質(zhì)基礎之一。生物體的生長、發(fā)育、遺傳和繁殖等一切生命活動都離不開蛋白質(zhì)。 里來生物技術優(yōu)勢
(1)高效蛋白提取液進行高質(zhì)量蛋白的提取,同時高效的蛋白酶抑制劑有效防止蛋白的降解及去磷酸化等作用;
(2)里來生物擁有多年的Western Blot檢測經(jīng)驗,為客戶提供專業(yè)的技術服務;
(3)里來生物為客戶設置預實驗,根據(jù)客戶樣品具體情況摸索上樣量和抗體稀釋度。
服務項目 | 規(guī)格 | 價格 |
骨/脂肪總蛋白提取 | 元/例 | ¥60.00 |
核/膜/質(zhì)/漿蛋白提取 | 元/例 | ¥60.00 |
里來生物技術優(yōu)勢:
(1)高效蛋白提取液進行高質(zhì)量蛋白的提取,同時高效的蛋白酶抑制劑有效防止蛋白的降解及去磷酸化等作用;
(2)里來生物擁有多年的Western Blot檢測經(jīng)驗,為客戶提供專業(yè)的技術服務;
(3)里來生物為客戶設置預實驗,根據(jù)客戶樣品具體情況摸索上樣量和抗體稀釋度。
實驗樣品要求:
(1)細胞不少于5×106個;
(2)組織樣品不少于50mg;
(3)總蛋白濃度不低于 2μg/μl(至少50μl);
注意事項:
(1)每張膜上做一種目的蛋白和相應的內(nèi)參蛋白。每張膜上可以做8個樣品。一般狀況下,2周即可完成實驗。如遇特殊情況,如一抗不好,蛋白濃度低或蛋白特殊,如分子量大等,周期會有所延長。
(2)Western Blot細胞蛋白樣本的準備及運輸:去掉培養(yǎng)液,用PBS洗一次后,加入少量PBS,用細胞刮將細胞刮下,用1ml槍吸取細胞易于1.5ml EP管中,快速離心(升至轉(zhuǎn)速就可stop)去除上清后,可按下面兩種方法運輸:A.細胞干運輸:將細胞干放入液氮速凍,-80℃保存; 如需長途過夜運輸,建議干冰運輸;如當天送達樣本,可用液氮或者-80℃冰袋運輸;B.細胞裂解液運輸:加入一定量的胞裂解液后即可冷藏運輸(冰袋或者冰盒)。如需檢測磷酸化蛋白,建議裂解液中加入終濃度1mM的NaF,NaF可抑制磷酸酶活性,保護蛋白磷酸化水平。如果加入裂解液后提取蛋白,則置于冰上裂解1 h,12000rpm離心10 min后取上清,即為蛋白樣本。蛋白樣本可-20度冷藏運輸(建議快遞寄送用干冰或者足量-80度冰袋),保存需要-80℃。
(3)蛋白樣本運輸:蛋白樣本需要經(jīng)過濃度測定,再進行變性,變性時先加入Sample buffer,再95℃ 10 min,Sample buffer可防止變性導致的蛋白沉淀析出。變性的蛋白可直接冷藏運輸,-20℃穩(wěn)定保存。
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