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一致性評價為什么要做HPLC-CAD指紋圖譜?

閱讀:41      發布時間:2024-11-20
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一致性評價"就像這“冬月里的一把火",紅透了大江南北,幾乎每一家藥廠都對這個詞鏤心刻骨。成分復雜的中藥注射劑也面臨著這樣的大考,所涉及的藥學等效性方面最you效的方法就是特征圖譜和指紋圖譜。

以為例,它是由紅參、麥冬制備而成的中藥復方注射劑,有益氣固脫、養精生陰、生脈之功能。目前,質量控制一般以人參皂苷Rg?、Re和Rb?為指標成分,而作為中藥復方制劑,僅靠少量指標成分的質量控制不能反映整個制劑的品質,也無法滿足一致性評價的技術要求。

圖1.

 

指紋圖譜作為目前中藥制劑整體分析的有效手段,可通過共有峰和對照指紋圖譜來對產品的相似度進行評價,是中藥注射劑一致性評價的技術手段。

 

 

新穎的檢測手段——CAD檢測器

電霧式檢測器(CAD)

電霧式檢測器(CAD)是一款新型通用型檢測器,靈敏度高,重現性好,能夠為難揮發化合物提供一致性的響應,可以更為準確的用于定量分析或半定量分析,目前美國藥典(USP)和歐洲藥典(EP),均發布了電霧式檢測器(CAD)測定方法。

 

采用電霧式檢測器(CAD)可有效對參麥注射劑中無紫外吸收成分進行測定,CAD作為紫外檢測器的有效補充,對于人參皂苷類成分具有較高的檢測靈敏度。

 

本實驗中,采用電霧式檢測器對9批次進行測定,指紋圖譜相似度軟件計算,在CAD測定譜圖上得到12個共有指紋峰。與11個已知對照品(人參皂苷Rg?、Re、Rf、Rb?、Rc、Rb?、Rb?、Rd和麥冬皂苷D、甲基麥冬黃烷酮A和甲基麥冬黃烷酮B)進行對照,識別出8個人參皂苷類共有指紋峰。

圖2.供試品溶液測定譜圖(CAD)

供試品溶液為取0.22µm濾膜過濾后制得,取3µL進液相色譜儀測定,流動相為yi腈和水梯度洗脫。測定所用色譜柱為Acclaim PA色譜柱,該型號色譜柱對于人參皂苷有特殊的選擇性,非常適合于該類化合物的分離,供試品溶液測定譜圖見圖2。

 

可靠的結果統計

使用2012版中藥指紋圖譜相似度計算軟件對9批不同批次的藥品的CAD測定譜圖進行相似度計算,匹配圖譜如下。

圖3.9批次樣品匹配生成對照指紋譜圖(色譜峰標號對應1.Rg? 2.Re 3.Rf 6.Rb? 7.Rc 8.Rb? 9.Rb? 11.Rd)

相似度計算結果顯示,不同批次的藥品具有較高的相似度,可以以此建立其對照指紋圖譜,作為判定藥品質量的依據。

 

圖4為11種混合對照品溶液測定譜圖,其中8個人參皂苷類化合物的色譜峰可以在對照指紋圖譜上找到。

圖4.對照品溶液測定譜圖(CAD)(色譜峰標號對應1.Rg? 2.Re 3.Rf 4.Rb? 5.Rc 6.Rb? 7.Rb? 8.Rd 9.麥冬皂苷D. 10.甲基麥冬黃烷酮A. 11.甲基麥冬黃烷酮B)

 

總結

CAD作為一款通用型檢測器,參數設置較少,較蒸發光檢測器使用簡便,靈敏度更高,適合用于沒有紫外吸收的皂苷類物質檢測。本方法分離度和靈敏度均較高,適用于含有這兩種藥材的復方中藥的組分研究和質量控制。

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