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用恒溫培養(yǎng)箱監(jiān)控細(xì)胞培養(yǎng)中的污染
大家都了解，細(xì)胞培養(yǎng)過程中難免會出現(xiàn)污染，小喆講解一下細(xì)胞污染如何鑒定。
細(xì)胞培養(yǎng)是生物醫(yī)學(xué)研究的常見操作，其中避免細(xì)菌污染是重要一環(huán)。細(xì)胞是否干凈，直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定性的好壞。
一般情況下細(xì)胞實(shí)驗(yàn)過程中出現(xiàn)的常見污染主要有：細(xì)菌污染、真菌污染和支原體污染。每種情況又分別有不同的癥狀和解決方法。
我們將分三篇文章，簡要概述三種不同污染的癥狀及處理方法。
細(xì)菌概述
細(xì)菌是一種原核細(xì)胞微生物，一般為微米級別。細(xì)胞培養(yǎng)過程中常見的污染菌為大腸桿菌、葡萄球菌
細(xì)菌污染癥狀
與其他污染相比，細(xì)菌污染在細(xì)胞培養(yǎng)過程中“發(fā)病"更為迅速，較容易被發(fā)現(xiàn)。具體表現(xiàn)為：
細(xì)胞培養(yǎng)基短期內(nèi)變黃且渾濁（大量酸性物質(zhì)累積）
靜置的培養(yǎng)液時不渾濁，但稍加震蕩，就有許多渾濁物漂起
可見培養(yǎng)液中有大量圓球狀顆粒物漂浮
細(xì)胞停止生長并有中毒表現(xiàn)，后出現(xiàn)大量死亡
細(xì)菌污染鑒定
簡易方法：
1、取少量培養(yǎng)液涂片染色檢查，憑經(jīng)驗(yàn)判斷細(xì)菌種類。
2、向肉湯培養(yǎng)基內(nèi)滴入少量培養(yǎng)液
細(xì)菌污染的祛除
對于一般細(xì)胞：發(fā)生污染直接丟棄，并對環(huán)境進(jìn)行消殺，紫外線滅菌、消毒液擦拭電熱恒溫培養(yǎng)箱、工作臺等。
對于重要且污染相對較輕的細(xì)胞：一般用抗生素的常用量的 5~10 倍作沖擊療法，用藥 24~48 小時后再換常規(guī)培養(yǎng)液，需要注意的是：
一旦發(fā)生污染后再使用抗生素常常難以祛除，有的抗生素只有抑菌作用而無殺菌效應(yīng)。
且有研究表明，大量使用抗生素，或?qū)?xì)胞基因組產(chǎn)生影響。