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什么是電穿孔儀，它是如何工作的？
閱讀：1198 發(fā)布時(shí)間：2024-9-2
電穿孔儀是一種利用高電壓電脈沖在細(xì)胞膜上形成暫時(shí)性納米孔，從而增加細(xì)胞膜的滲透性，使得平時(shí)不能或很難穿過(guò)細(xì)胞膜的分子能夠進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的技術(shù)。這項(xiàng)技術(shù)在生物技術(shù)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域有廣泛的應(yīng)用，如基因轉(zhuǎn)染、藥物傳遞等。
電穿孔儀的工作原理：
1、電場(chǎng)應(yīng)用：工作時(shí)，首先會(huì)在含有細(xì)胞的介質(zhì)中施加一個(gè)短時(shí)的、高強(qiáng)度的電場(chǎng)。這個(gè)電場(chǎng)通常由電極產(chǎn)生，電極間的距離和電場(chǎng)強(qiáng)度都是可以調(diào)節(jié)的參數(shù)。
2、細(xì)胞膜的改變：在電場(chǎng)作用下，細(xì)胞膜上會(huì)形成納米級(jí)的孔洞。這些孔洞的形成機(jī)制主要與電場(chǎng)對(duì)細(xì)胞膜上脂質(zhì)分子的重新排列有關(guān)。電場(chǎng)使得細(xì)胞膜上的磷脂分子頭部朝向電場(chǎng)的負(fù)極，而疏水的尾部則朝向正極，這種重新排列導(dǎo)致膜的穩(wěn)定性下降，從而形成孔洞。
3、孔洞的動(dòng)態(tài)：這些孔洞是動(dòng)態(tài)的，它們?cè)陔妶?chǎng)作用后不久就會(huì)自行封閉。孔洞的存在時(shí)間通常很短，從幾毫秒到幾秒不等，具體時(shí)間取決于電場(chǎng)的強(qiáng)度、持續(xù)時(shí)間以及細(xì)胞類(lèi)型。
4、物質(zhì)傳遞：在孔洞開(kāi)放的時(shí)間里，平時(shí)難以穿透細(xì)胞膜的大分子(如DNA、RNA、蛋白質(zhì)及某些藥物)得以進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部。這一特性被廣泛應(yīng)用于將外源基因?qū)爰?xì)胞(轉(zhuǎn)基因)以及提高某些藥物的療效。
5、細(xì)胞的恢復(fù)與應(yīng)用：一旦電場(chǎng)被移除，細(xì)胞膜上的孔洞會(huì)逐漸閉合，細(xì)胞恢復(fù)正常狀態(tài)。這期間，被轉(zhuǎn)入的物質(zhì)可以在細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮作用。例如，在基因治療中，轉(zhuǎn)入的DNA可以被細(xì)胞的核讀取并轉(zhuǎn)錄成蛋白質(zhì)。
總的來(lái)說(shuō)，電穿孔儀是一個(gè)強(qiáng)大的工具，它通過(guò)物理方式暫時(shí)改變細(xì)胞膜的通透性，使得細(xì)胞吸收或內(nèi)部整合那些通常無(wú)法直接通過(guò)細(xì)胞膜的大分子成為可能。