GPC凝膠凈化系統(tǒng)是一種高效的分離純化工具，廣泛應(yīng)用于科學(xué)研究和工業(yè)領(lǐng)域。為了確保其性能穩(wěn)定、數(shù)據(jù)準(zhǔn)確，操作人員必須遵循一系列嚴(yán)格的操作規(guī)范和維護(hù)流程。將詳細(xì)介紹GPC凝膠凈化系統(tǒng)的使用方法和日常維護(hù)注意事項(xiàng)。
一、流動(dòng)相的準(zhǔn)備與使用
1. 流動(dòng)相純度要求：建議使用色譜純及以上級(jí)別的流動(dòng)相(如乙酸乙酯：環(huán)己烷=1:1或二氯甲烷)。流動(dòng)相的純度直接影響到分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性。
2. 配置流動(dòng)相：根據(jù)凝膠凈化色譜柱上的標(biāo)簽規(guī)格要求配置相應(yīng)的流動(dòng)相。對(duì)于特定標(biāo)簽的凝膠色譜柱，應(yīng)嚴(yán)格按照規(guī)定的流動(dòng)相比例進(jìn)行配置，避免使用不合適的流動(dòng)相對(duì)色譜柱造成損害。
3. 過(guò)濾與脫氣：流動(dòng)相應(yīng)使用0.45微米的濾膜過(guò)濾，并超聲脫氣混合均勻。這一步驟能夠有效去除流動(dòng)相中的雜質(zhì)和氣泡，保證系統(tǒng)的正常運(yùn)行。
4. 適量配制：由于方法中的流速為5mL/min，如果實(shí)驗(yàn)樣品數(shù)量較多，應(yīng)一次性配好充足的流動(dòng)相，避免在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中添加。中途添加流動(dòng)相易產(chǎn)生氣泡，導(dǎo)致基線不穩(wěn)定。
二、樣品處理
1. 樣品溶劑選擇：在選擇樣品溶劑時(shí)，應(yīng)盡量選擇與流動(dòng)相極性相符的溶劑，推薦使用流動(dòng)相作為樣品溶劑。這有助于減少樣品對(duì)凝膠色譜柱的影響，提高分離效果。
2. 樣品過(guò)濾：樣品在進(jìn)樣前必須經(jīng)過(guò)0.45微米微孔膜過(guò)濾，以防止顆粒物進(jìn)入系統(tǒng)，堵塞色譜柱或損壞儀器。
三、系統(tǒng)操作
1. 開(kāi)機(jī)準(zhǔn)備：將儀器及電腦各部分電源打開(kāi)，待檢測(cè)器自檢通過(guò)后(約2分鐘)，再打開(kāi)工作站軟件。確保所有連接正常，通訊成功。
2. 清洗與平衡：點(diǎn)擊工作站主界面左邊的【手動(dòng)控制】，選擇【GPC信息】窗口，點(diǎn)擊【餾分】，輸入注射泵體積“8” mL，點(diǎn)擊【清洗】。完成后，設(shè)置輸液泵流量為5 mL/min，點(diǎn)擊【運(yùn)行】。色譜柱平衡時(shí)間一般為30分鐘，若長(zhǎng)期未使用則需要適當(dāng)延長(zhǎng)平衡時(shí)間。
3. 方法查看與批表編輯：在【方法管理】中查看方法參數(shù)，新建批表并選擇運(yùn)行方法。確保所有設(shè)置正確無(wú)誤后，再進(jìn)行樣品分析。
四、日常維護(hù)
1. 輸液泵壓力監(jiān)控：如發(fā)現(xiàn)控制面板上的輸液泵壓力變大或報(bào)警停泵，需將儀器的放空濾片座卸下來(lái)用流動(dòng)相超聲清洗10~20分鐘后再安裝使用。
2. 長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí)的保養(yǎng)：若長(zhǎng)時(shí)間不使用GPC凝膠系統(tǒng)，請(qǐng)先用對(duì)應(yīng)的流動(dòng)相將凝膠色譜柱沖洗10～20分鐘，然后取下并用聚四氟堵頭將其兩端封好。下次使用時(shí)再重新安裝，并用流動(dòng)相沖洗十分鐘以上，使其基線達(dá)到平穩(wěn)后再使用。
3. 管路清洗：若使用GPC儀器做茶葉等顏色較深的樣品，當(dāng)回收率降低時(shí)，每隔半個(gè)月將凝膠凈化色譜柱拆下來(lái)，用不銹鋼兩通替代柱子連接管路，把流動(dòng)相換成甲醇：丙酮(1:1)，沖洗管路一個(gè)小時(shí)，然后換回流動(dòng)相沖洗二十分鐘，再把凝膠柱安裝上繼續(xù)使用。
4. 保護(hù)柱(預(yù)柱)清洗：當(dāng)回收率降低時(shí)，如有保護(hù)柱(預(yù)柱)，用甲醇：丙酮(1:1)，低流速反向沖洗二十分鐘。
5. 廢液處理：及時(shí)處理廢液瓶，避免廢液過(guò)滿而流出造成的污染。
6. 自動(dòng)液體處理器維護(hù)：在使用過(guò)程中不要隨便移動(dòng)或變更樣品盤上的樣品架，以防進(jìn)樣針折斷等事故發(fā)生。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，盡可能做一些防塵措施，以延長(zhǎng)其使用壽命。
五、實(shí)驗(yàn)結(jié)束后的操作
實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，請(qǐng)點(diǎn)擊工作站左側(cè)下方的【手動(dòng)操作】按鈕，選擇【GPC信息】項(xiàng)，點(diǎn)擊【輸液泵】中的【停止】按鈕，關(guān)閉輸液泵后，再關(guān)閉工作站，最后分別將儀器及電腦的電源關(guān)閉。
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