當你導師安排養一個沒養過的細胞，不知道用什么培養基的時候，是否也在為選培養基而苦惱?面對DMEM培養基、MEM培養基、F12培養基、1640培養基等種類繁多的培養基時要怎么選擇呢？
這種時候大家要一起記住：
ü 沒有什么培養條件是jue對正確的；
ü 沒有什么細胞是咱養不活的；
ü 參考文獻沒有那就不參考了；
ü 反正文獻也不一定是對的；
但如果你的細胞沒STR鑒定過，沒有親自原代分離過，還各種支原體立克次氏體污染、黑膠蟲污染，那你當我沒說。我勸你盡快丟掉！
讓我們先科普下培養基的選擇。
目前合成培養基主要有：
→基礎培養基（常用）
→無血清培養基
→無蛋白培養基
→限定化學成分培養基
它們對血清添加量的要求各不相同，目前常用的是基礎培養基。基礎培養基是細胞生存的直接環境，為細胞生長提供豐富的營養物質，并能調節培養體系的 pH值和滲透壓。因此培養基的質量和選擇對于細胞培養至關重要。
四種常用培養基的比較：
培養基類型 | 基本概述 | 組成成分 | 適用范圍 | 應用范圍 |
RPMI-1640 Medium | RPMI-1640廣泛應用于哺乳動物、特殊造血細胞、正常或惡性增生的白細胞，雜交瘤細胞的培養，是目前應用十分廣泛的培養基。 | 含有還原劑谷胱甘肽、高濃度的維生素，生物素。WEI生素B12以及PABA。 | HeLa、JurkatMCF -7 PC12PBMC、星形片質細胞，癌細胞K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細胞、T細胞淋巴瘤細胞以及HCT-15上皮細胞等均可參考使用。 | 尤其適用于懸浮細胞的培養。 |
MEM（Minimum Essential Medium） | 也稱最di必需培養基，它僅含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素。成分簡單，可廣泛適應各種已建成細胞系和不同地方的哺乳動物細胞類型的培養。 | 僅含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素。 | MEM-Alpha一般用于培養一些難培養細胞類型，而其它沒有特殊之處的細胞株則幾乎均可采用MEM來培養。HeLaBHK-21 293 T、HEP-2、HT-1080、MCF-7、成纖維細胞，原代大鼠星形膠質細胞等。 | 適于各種哺乳動物細胞的生長。 |
DMEM高糖（標準型） | DMEM-高糖（標準型） 是一種應用十分廣泛的培養基，可用于許多哺乳動物細胞培養,更適合高密度懸浮細胞培養。 | DMEM培養基 與MEM培養基相比，氨基酸的含量增加了2倍，維生素增加了4倍，同時還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及丙酮酸鈉氨基酸。 | 適用于附著性較差，但又不希望它脫離原來生長點的克隆培養，也可用于雜交瘤中骨髓瘤細胞和DNA轉染的轉化細胞的培養。原代成纖維細胞 神經元膠質細胞、HUV EC、平滑肌細胞 HeLa293T、PC-12等細胞系。 | DMEM高糖型:應用于生長快、粘附性低的細胞，雜交瘤的骨髓瘤細胞、克隆細胞、DNA轉染的轉化細胞、原代病毒宿主細胞，單一細胞。 |
DMEM/ F12 | DMEM/F12培養基適于克隆密度的培養。F12培養基成分復雜，含有多種微量元素，和DMEM以1：1結合，稱為DMEM/F12培養基（DME/F12medium），作為開發無血清配方的基礎，以利用F12含有較豐富的成分和DMEM含有較高濃度的營養成分為優點。 | DMEM/F-12 DMEM培養基和Hams F-12培養基的1:1混合物。 | 該培養基適用于血清含量較低條件下哺乳動物細胞培養。為了增強該培養基的緩沖能力，改良之一是在DMEM/F12（1：1）中加入15mMHEPES緩沖液。MDCK 神經膠質細胞、成纖維細胞、人內皮細胞、大鼠成纖維細胞等。 | 1.廣泛用于支持多種哺乳動物細胞的生長； 2.無血清培養基的基礎: 3.低血清含量下哺乳動 物細胞的培養以及克隆密度培養。 |
一、常見貼壁細胞培養條件：
1.接種濃度5×10*8個細胞/L；
2.培養基：MEM或DMEM，胎牛血清濃度：10%-80%；
3.37℃，5%CO2培養箱；
4.起始培養減少震蕩，防止貼壁細胞脫落。
二、常見懸浮細胞培養條件：
1.原代培養時盡量去紅；
2.短期培養可選擇添加10%胎牛血清的RPMI 1640；長期培養淋巴細胞時，要加入細胞因子；
3.37℃，5%CO2培養箱；
4.每隔3天進行半量換液。
本期內容：DMEM、MEM、F12、1640培養基區別在哪里?
下期內容：如何讓細胞“凍"起來？
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