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【瑞士步琦】SFC分離木犀草素的應用

閱讀:564      發布時間:2024-7-30
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瑞士步琦

SFC 分離木犀草素

SFC應用

"


1



簡介

紫蘇(Perilla frutescens)是一種草本植物,其葉和種子中含有多種生物活性成分,包括木犀草素(Luteolin),這是一種具有多種藥理作用的黃酮類化合物。木犀草素具有抗氧化、抗炎、抗腫瘤等生物活性。



【瑞士步琦】SFC分離木犀草素的應用


Luteolin


采用傳統的 Prep HPLC 方式雖然可以將木犀草素從紫蘇提取物中進行分離,但是制備時間較長且流動相損耗量較高,無論從時效性還是經濟效益角度出發,都不是最佳的選擇。


2



常規制備色譜洗脫條件

  • C18, 10x250mm, 15um

  • 梯度洗脫, 水/乙醇 +1% 甲酸

  • 進樣量:0.5mL

  • 流速:15mL/min


【瑞士步琦】SFC分離木犀草素的應用

木犀草素色譜峰在 36min 之后


除了洗脫時間較長之外,由于流動相中水的存在,也給后續木犀草素樣品的濃縮帶來一定的麻煩。(即使步琦的旋轉蒸發儀能夠解決這一問題)。


3



采用 SFC 樣品純化

那么是否可以采用超臨界流體色譜(SFC)的方式進行樣品的純化呢?


首先我們采用 Sepmatix SFC 8X 平行液相色譜快速篩選適合于木犀草素分離的色譜柱。


實驗條件:

  • 流速:3mL/min

  • 運行時間:15min

  • 梯度洗脫 10-60% 甲醇


【瑞士步琦】SFC分離木犀草素的應用

紫蘇提取物在 PEI 色譜柱上具有更好的分離效果


之后采用 Prep SFC-50 對樣品進行大量分離與制備。


實驗條件:

  • PEI, 10x250mm, 5um

  • 梯度洗脫 20-40% 甲醇 5min

  • 進樣量:0.3mL

  • 流速:20mL/min


【瑞士步琦】SFC分離木犀草素的應用

木犀草素色譜峰在 2min 之后


兩種不同分離方式對比:

萃取條件

Prep HPLC

Prep SFC

木犀草素色譜峰

36min 之后

2min 之后

總運行時長

42 min + 15 min平衡

8 min + 1 min 平衡

總溶劑使用

390ml ethanol + 240ml water

50 ml methanol


4



實驗結論

通過對比發現,SFC 在分離木犀草素的過程中,無論從時效性還是溶劑消耗量上都優勢明顯。



【瑞士步琦】SFC分離木犀草素的應用





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